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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
39
- 英文名：
PCR 法 DNA 探针标记试剂盒
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
5次
PCR 法 DNA 探针标记试剂盒5次品牌详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是PCR 法 DNA 探针标记试剂盒5次品牌的相关产品：
*泊甙33419-42-0质量规格：>98%,BR,可用于细胞培养
*泊甙（标准品）33419-42-0质量规格：HPLC>98%,标准品
依西美坦（企标）107868-30-4质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养
醋酸艾塞那肽141732-76-5质量规格：纯度98%以上
非那雄胺98319-26-7质量规格：>99%,BR
原儿茶醛,3,4-二羟基苯甲醛3,4-Dihydroxybenzaldehyde质量规格：≥98%
原儿茶醛(标准品)3,4-Dihydroxybenzaldehyde质量规格：HPLC≥98%，标准品
甲砜霉素甘氨酸酯盐酸盐Thiamphenicol glycinate HCl质量规格：>98%,BR
2.4-二羟基-6-甲基-烟酸乙酯Ethyl 2,4-dihydroxy-6-methylnicotinate质量规格：>98%
恩拉霉素,持久杀菌素Enduracidin质量规格：BR,含量8%以上
抑肽酶(来源于牛肺,胰蛋白酶抑制剂)质量规格：≥3TIU/mg,进分,来源: 牛肺或牛胰Aprotinin
E-64,蛋白酶抑制剂质量规格：>98%,BRE64
阿齐沙坦酯质量规格：>98%,BRAzilsartan Medoxomil
α-淀粉酶质量规格：BR，4000u/gα-Amylase
α-糜蛋白酶质量规格：1500USP u/mg,猪源Chymotrypsin
0.1%蛋白胨水溶液200ml 沙保罗琼脂平板90mm
珊瑚链霉菌 粗糙脉孢菌
嗜热脂肪地芽孢杆菌 铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)
果香地霉 解脂假丝酵母
间型酒香酵母 马克斯克鲁维酵母
冰核细菌 黄绿绿僵菌
红曲霉菌 杰丁汉逊酵母
苏云金芽胞杆菌莫氏变种Bacillusthuringiensisvar.merrisoni 嗜水气单胞菌
大肠埃希菌ATCC25922冻干粉 白腐菌
刺孢吸水链霉菌 缺陷假单胞菌冻干粉
PCR 法 DNA 探针标记试剂盒5次品牌大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大丽花轮枝孢
鲜橙曲霉 金霉素链霉菌
赭绿青霉 马链球菌兽疫亚种
豌豆根瘤菌 金黄色葡萄球菌(敏感菌株)ATCC25923冻干粉
空肠弯曲杆菌 粉红木霉
操作步骤:
1. PCR 法 DNA 探针标记试剂盒5次品牌匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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文献和实验. None of the published formulas for calculating annealing temperatures has been proven to give better than a rough estimate. The PCR Process In a nutshell,PCR works like this: DNA and two primers are combined in a salt solution with dNTPs and a heat stable DNA
一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法
no.DQ434847）转入烟草（Nicotiana tabacum L.cv.W38），所得T0代植株在16h光照（25℃）/8h黑暗条件下培养。1.2 方法1.2.1 转基因植物的PCR鉴定 随机挑取六株T0代转基因烟草，采用植物基因组DNA提取试剂盒（北京天根生化科技有限公司）提取基因组DNA模板，另外分别以未转化的野生型烟草基因组DNA以及含有OSsec27p的重组质粒作为阴性和阳性对照模板，使用OSsec27p基因特异性引物进行PCR扩增。 取部分扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测，检测
。 a.时间越长，DNA的产量越多，污染也越多 7. 12000转速离心5-10min，去上清，倒置于吸水纸上数分钟，加入700µl 70%的酒精，上下颠倒数次，洗涤沉淀。12000转离心5-10m，去上清，倒置于吸水纸上数分钟。重复一遍。 8. 12000转速离心5-10min，去上清，倒置于吸水纸上数分钟，最后置于超净工作台中吹干。 9. 在离心管中加入30-50µl的灭菌去离子水或者TE溶液，4℃放置数小时，使其充分溶解。 10
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