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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
35
- 英文名:
质粒 ( 载体 ) 系列产品
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
2μg
1)质粒 ( 载体 ) 系列产品2μg费用客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
以下是质粒 ( 载体 ) 系列产品2μg费用的详细介绍点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品:

储存事项:
A. 质粒 ( 载体 ) 系列产品2μg费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 质粒 ( 载体 ) 系列产品2μg费用组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤:
(1) 质粒 ( 载体 ) 系列产品2μg费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
BCA 法蛋白定量试剂盒500 次 Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活剂 ) 1mg
超敏型 BCA 法蛋白定量试剂盒500 次 PDTC(NF-κB 抑制剂 / 抗氧化剂 )1g
还原剂兼容型 BCA 蛋白定量试剂盒250 次 PD 98059(MAPKK 抑制剂 )2mg
改良 Lowry 法蛋白定量试剂盒1000 次 PCR 专用 LIC 克隆套装1μg
蛋白酶抑制剂混合液2×0.5mL PCR 优化试剂盒1套
固相 RNase 清除剂250mL 柱式病毒 RNA-DNA 双提试剂盒50 次
气相 RNase 清除剂120mL 柱式病毒 DNAout50 次
液相 RNase 清除剂1.5mL 柱式 Ti 质粒 DNAout 50 次
氧钒核糖核苷复合物 (RVC),0.2M10mL 柱式 RNA 纯化试剂盒50 次
RNA 长效液1.5mL 柱式 OLIGO 回收试剂盒50 次
柱式酱油 DNAout10 次 液相内毒素清除剂500 次
溶壁酶干粉1g 液相内毒素清除剂100 次
蜗牛酶干粉5g 液相 RNase 清除剂1.5mL
消解酶 ( 溶细胞酶 ) 干粉100mg 液体蛋白纯化回收试剂盒50 次
真菌 DNAout50 次 液体 RNAout50 次
阿尔莱特葡萄球菌 Phenylobacteriummuchangponense 模式菌株
中华根霉 鞘醇单胞菌 模式菌株
滑菇、光帽黄伞 白色念珠菌ATCC90028冻干粉
迟缓芽孢杆菌 隐甲藻
蜡样芽孢杆菌CMCC63301冻干粉 鸡腿蘑(毛头鬼伞)
大肠埃希氏菌(大肠杆菌) 烬灰链霉菌 Micromonospora cinereogriseus
玫瑰红琼脂培养基70mm 浅玫瑰小单孢菌 Micromonospora roseolus
球毛壳 胰酪胨大豆琼脂培养基200ml/瓶
枯草芽孢杆菌 多头霉
硫乙醇酸盐平板培养基70mm 金针菇
质粒 ( 载体 ) 系列产品2μg费用改良马丁培养基40ml 熏衣草灰链霉菌
粟褐芽孢杆菌 杏鲍菇
嗜盐四联球菌(酱油片球菌) 葡酒色被孢霉
毛木耳(紫木耳、黄背木耳) 苏云金芽胞杆菌托马诺夫亚种Bacillusthuringiensissubsp.toumanoffii
深红酵母 粪肠球菌ATCC29212冻干粉
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文献和实验,整个与其黏合的大肠杆菌染色体会依序地被传送到受株中。大肠杆菌的基因图谱就是靠这种方式完成的。你也可以利用泛宿主性结合质粒在其它菌种中做类似的工作,但因DNA 定序技术的高度发展已使得这类工作显得费时与不够精确了。 八、载体(vector) 载体的主要功能在基因选殖(cloning),选殖的主要目的是分离、纯化及繁殖特定的基因。细菌性载体主要有质粒载体(plasmid vector)和噬菌体载体(phage vector)两种,我们这里所谈的以质粒载体为主。质粒载体的基本条件是:1.它们是复制
现在分子生物学使用的质粒 载体 都已不是原来细菌或细胞中天然存在的质粒,而是经过了许多的人工的改造。从不同的实验目的出发,人们设计了各种不同的类型的质粒 载体 ,近年来发展很快,新的有特定用途的质粒不断被创建。图20-2给出最常用的大肠杆菌克隆用质粒pUC19的图谱,此质粒的复制起点处序列经过改造,能高频率起动质粒复制,使一个细菌pUC19的拷贝数可达500-700个;质粒携带一个抗氨�青霉素基因,编码能水解β-内酰胺环,从而被坏氨�青霉
frequency of recombination)。当Hfr的F-质粒做结合生殖时,整个与其黏合的大肠杆菌染色体会依序地被传送到受株中。大肠杆菌的基因图谱就是靠这种方式完成的。你也可以利用泛宿主性结合质粒在其它菌种中做类似的工作,但因DNA定序技术的高度发展已使得这类工作显得费时与不够精确了。 八、载体(vector) 载体的主要功能在基因选殖(cloning),选殖的主要目的是分离、纯化及繁殖特定的基因。细菌性载体主要有质粒载体(plasmid vector)和噬菌体载体(phage
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