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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
58
- 英文名：
DH5α 化学感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
0.1mL×10
(1) DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10规格实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10规格的详细介绍点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品：
储存事项:
A. DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10规格在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10规格组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
dNTP 溶液 ,10mM0.5mL 古细菌种属鉴定 PCR Mix 1100 次
dNTP 溶液 ,10mM5mL 古细菌 + 真细菌种属鉴定 PCR Mix 3100 次
dNTP 溶液，2.5mM0.5mL 宫颈采样拭子 B 50 支
dNTP 溶液，2.5mM5mL 宫颈采样拭子 A 50 支
dNTP 溶液，100mM 0.5mL 革氏阳性细菌质粒 DNAout50 次
柱式毛发 DNAout50 次 一站式 Blue Native PAGE 电泳套装30 次
痰液 DNAout50 次 一管式植物 DNAout500 次
痰液采集器1个 一管式植物 DNAout50 次
柱式骨骼 DNAout50 次 一管式双链 cDNA 合成试剂盒10 次
柱式拭子 DNAout50 次 一管式拭子 DNAout20 次
一步式广谱 DNAout10mL 土壤 RNAout50 次
微量核酸提取试剂盒50 次 土壤 DNAout30 次
微量核酸提取试剂盒200 次 土壤 DNAout100 次
液体 DNAout50 次 土霉素盐酸盐溶液 ,100mg/mL10mL
液相内毒素清除剂100 次 通用型全基因组扩增试剂盒30 次
白色链霉菌 变异链球菌
枯草芽孢杆菌深黑变种 绿色链霉菌
肺炎克雷伯菌冻干粉 鲁氏结合酵母
玖红穗状霉 玫烟色拟青霉 生物防治
干酪棒杆菌（乳酪棒杆菌） 露湿漆菌 分解纤维素，产抗菌素
岛青霉 哈氏弧菌
木层孔菌 胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基(二)60mm洗必泰、季铵盐类消毒剂的消毒过的物表
黑曲霉菌冻干粉 荨麻青霉
类芽孢杆菌 婴儿双歧杆菌
阴沟肠杆菌（阴沟肠杆菌阴沟亚种） 米曲霉 曲酸生产菌。
DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10规格固囊酵母 裂褶菌
奇异变形杆菌冻干粉 寄生曲霉
肠膜明串珠葡萄聚糖亚种 苜蓿根瘤菌
苏云金芽胞杆菌库尔斯塔克亚种 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki 福氏志贺氏菌
卷枝毛霉 荚膜红细菌
服务流程：
1）DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10规格客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
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文献和实验woowe97417 要转一个带氯霉素抗性的质粒到DH5α保存，但是发现用的DH5α对氯霉素不敏感，氯霉素是用无水乙醇配的，有做过类似实验的站友帮忙解答一下，谢谢啦！ gingivalis 严谨型质粒 25 ug/ml 松弛性质粒 170 ug/ml 《现代分子生物学实验技术》--P753 (卢圣栋) DH5α应该对氯霉素敏感，如果在上述两个浓度条件下，DH5α能生长
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法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞：处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子)：带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞，用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态，然后与 pUC18质粒共保温，实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因，因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性，用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释，在含氨
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