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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
28
- 英文名：
Denhardt 溶液，
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50×100mL
(1) Denhardt 溶液，50×100mL费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是Denhardt 溶液，50×100mL费用的详细介绍点击了解更多探针标记及检测产品：
储存事项:
A. Denhardt 溶液，50×100mL费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. Denhardt 溶液，50×100mL费用组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
美洛昔康（标准品）71125-38-7质量规格：HPLC>98%,标准品
盐酸美金刚胺41100-52-1质量规格：>99%
盐酸美金刚（标准品）41100-52-1质量规格：含量测定
甲氨蝶呤21672质量规格：>99%,BR
甲氨蝶呤（标准品）21672质量规格：HPLC>99%,标准品
硬脂酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质)Methyl Stearate质量规格：>99.5%(GC),标准物质
亚麻酸甲酯(>98.0%(GC),标准物质)Methyl Linolenate质量规格：>98.0%(GC),标准物质
亚油酸甲酯(>99.0%(GC)，标准物质)Methyl Linoleate质量规格：>99.0%(GC)，标准物质
1-十一烯(>99.5%(GC),标准物质)1-Undecene质量规格：>99.5%(GC),标准物质
1-十二烯(>99.5%(GC),标准物质)1-Dodecene 质量规格：>99.5%(GC),标准物质
胰酶(1:4500)质量规格：酶活1:4500,BRPancreatin
枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君质量规格：>98%,BROrphenadrine citrate
β-半乳糖苷酶质量规格：700u/mg，罗氏分装β-Galactosidase
脱落酸(标准品)质量规格：98%,标准品Abscisic acid,S-ABA
脱落酸(高纯)质量规格：98%,BRAbscisic acid,S-ABA
白灵菇（白灵侧耳） 洋葱曲霉
0.5%葡萄糖肉汤100ml 鲍曼不动杆菌
泾阳链霉菌 营养琼脂培养基90mm
肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种 紫红曲霉
亚膜汉逊酵母 蜃楼耶尔森氏菌
成团肠杆菌(成团泛菌) 美味丝葚霉 Papulaspora sapidus
威尼斯不动杆菌 小麦纹枯病菌 Pellicularia gramineum
真线侧耳短孢变种 黄灰青霉 Penicillium aurantiogriseum
宇佐美曲霉 胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)70mm
多主枝孢 沙链霉菌
Denhardt 溶液，50×100mL费用冬虫夏草 乳酸链球菌 Lactococcus lactis
硫乙醇酸盐平板培养基70mm 苏云金芽胞杆菌苏云金变种 Bacillus thuringeinsis subsp. thuringeinsis
丁香假单胞菌 白浅灰链霉菌
侵蚀侏儒囊菌 丝球毛霉
皮状丝孢酵母 炭黑曲霉
服务流程：
1）Denhardt 溶液，50×100mL费用客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
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文献和实验过硫酸胺 0.1 g ，加超纯水1.0 mL 溶解后，4 ℃ 保存，保存时间为 1 周。（-20 ℃长期保存） 30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中，定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS（2L） NaOH 调 pH 值至 7.4，定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后，分装于 1.5 mL 离心管中，4 ℃ 可保存数周，-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存，1 次溶液可重复
；3. 用等体积酚/氯仿/异戊醇抽提样品，1700×g，离心 10 min。如果样品溶解得不好，再加 1 体积不含蛋白酶 K 的消化缓冲液，重复离心。如果在界面上有一层厚的白色物质，重复抽提一次，将上层 (水溶液) 转移至一个新离心管中；4. 加入 1/2 体积 7.5mol/L 乙酸铵和 2 倍体积 100% 乙醇，12 000 rpm 离心 2 min；5. 用 70% 乙醇洗涤，晾干，沉淀用 TE 缓冲液或无菌双蒸水重新溶解, 使终浓度在约 1 mg/mL。注: 加入 0.1% 的 SDS 和 1? 滋
将dna固定于尼龙膜上的杂交 denhardt试剂通常配制50×贮存液，过滤后保存于-20℃。可将该贮存液10倍稀释于预杂交液（常为含有0.5%sds和100μg/ml经变性被打断的鲑精dna的6×ssc或6×sspe）中。50×denhardt液中含5g聚蔗糖（ficoll,400型，pharmacia）、5g聚乙烯吡咯烷酮和5g牛血清白蛋白（组分v”sigmal），加水至终体积为500ml
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