TG1 化学感受态细胞0.1mL×10规格

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服务流程：
1）TG1 化学感受态细胞0.1mL×10规格客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
储存事项:
A. TG1 化学感受态细胞0.1mL×10规格在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. TG1 化学感受态细胞0.1mL×10规格组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
EGY48 酵母感受态细胞10×100μL  U0126(MEK1/2 抑制剂 )1mg
NMY51 酵母感受态细胞10×100μL  Tuner(DE3)plysS 感受态细胞0.1mL×10
Y187 酵母感受态细胞10×100μL  Tuner(DE3) 感受态细胞0.1mL×10
Y2HGold 酵母化学感受态细胞10×100μL  Tubulin-Tracker Red( 微管红色荧光探针 )40μL
DNA 快速连接试剂盒30 次  TSQ(6- 甲氧基 -(8-p- 甲苯磺酰胺 ) 25mg
磁珠植物 DNAout50 次  一步法质粒 DNAout 2.050 次
大提柱式植物 DNAout4次  一步法质粒 DNAout 2.0100 次
百万碱基级植物 DNAout 10 次  一步法无内毒素质粒 DNAout50 次
Southern 级植物 DNAout 10 次  一步法单菌落质粒 DNAout50 次
一管式植物 DNAout50 次  一步法大提质粒 DNAout5次
一步法 96 孔板质粒 DNAout( 真空法 )1次  脱脂奶粉 ( 杂交专用 )50g
一步法单菌落质粒 DNAout50 次  脱氧胆酸5g
一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 离心法)1次  兔抗 His 标签多抗，HRP 标记100μL
一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 离心法)5次  兔抗 GST 标签多抗20μL
一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 真空法)1次  土壤腐殖酸清除剂100mL
白色念珠菌ATCC90029冻干粉   改良马丁琼脂培养基90mm
雪白根霉   食油假单胞菌
猪霍乱沙门氏菌猪霍乱亚种   汉逊德巴利酵母
福氏志贺菌冻干粉   大肠埃希氏菌
肺炎克雷伯氏菌   嗜肺军团菌
地生翅孢壳   产气肠杆菌AS1.489冻干粉
类干酪乳杆菌类干酪亚种   固囊酵母
改良马丁琼脂培养基70mm   诺尔斯氏链霉菌
球型芽孢杆菌   褐球固氮菌（需一周准备） Azotobacter chrooccum
产气荚膜梭菌   维涅兰德固氮菌 Azotobacter vinelandii
TG1 化学感受态细胞0.1mL×10规格光滑念珠菌KTCC0001冻干粉南京便诊   浑浊红球菌
黄萎轮枝孢   醋酸醋杆菌
白色葡萄球菌   特异青霉
大肠埃希菌冻干粉   产氨短杆菌
谷氨酸棒杆菌   单增李斯特菌
实验步骤：
(1) TG1 化学感受态细胞0.1mL×10规格实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)