疑难解答: Q:为何Pfu DNA Polymerase扩增效率不如Taq DNA Polymerase?
A:一是由于Pfu DNA Polymerase 具有3′-5′的外切活性,所以在合成过程中,该酶会随时校对新添加的核苷酸是否配对,影响了合成效率;二是它能通过3′-5′的外切活性使引物部分降解,降低引物结合模板的能力,进而影响扩增效率。三是上面提到的尿嘧叮抑制作用。
Q:使用本产品时还有哪些注意事项?
A:1.引物长度和浓度一般应比常规的PCR 长和高(考虑到被Pfu DNA Polymerase的3′-5′的外切活性降解的因素);
2.最好在反应前加Pfu DNA Polymerase。