相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Hifair® IV Reverse Transcriptase
- 保质期:
-20 ºC保存。有效期一年。
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20 ºC
- 规格:
10000U
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
| Hifair® IV Reverse Transcriptase 第四代耐热逆转录酶 | 11112ES92 | 10000 U | 1525.00 |
| Hifair® IV Reverse Transcriptase 第四代耐热逆转录酶 | 11112ES93 | 5×10000 U | 5425.00 |
产品描述
Hifair® IV Reverse Transcriptase是在Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的全新逆转录酶,与Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase相比,其热稳定性大幅度提高,可耐受60℃,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合低拷贝基因的逆转录和mRNA文库构建。Hifair® IV Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可扩增长达10 kb的cDNA。
产品组分
| 编号 | 组分 | 产品编号/规格 | |
| 11112ES92 (10000 U) | 11112ES93 (5×10000 U) | ||
| 11112-A | 5×Hifair® IV Buffer | 250 μL | 1200 μL |
| 11112-B | Hifair® IV Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
产品应用
全长cDNA文库构建;终点法PCR;实时定量PCR等。
活性定义
以Poly(A) .Oligo(dT)为模板-引物,在37℃,10 min内,将1 nmol的dTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制
核酸外切酶残留检测:200 U本酶和1 μg λDNA-Hind IV,37 ºC下孵育1 h,DNA的电泳谱带不发生变化;
核酸内切酶残留检测:200 U本酶和1 μg Supercoiled pBR322 DNA,37 ºC下孵育1 h,DNA的电泳谱带不发生变化;
RNase残留检测:200 U本酶和1 μg小鼠肝脏总RNA,37 ºC下孵育1 h,RNA电泳谱带不发生变化。
运输与保存方法
冰袋运输。
-20 ºC保存。有效期一年。
注意事项
1)请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染;
2)所有操作均应在冰上进行,防止发生RNA降解;
3)为保证逆转录成功,建议使用高质量的RNA样本;
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
第一链cDNA合成操作步骤
1. RNA变性(此步为可选步骤,RNA变性有助于打开二级结构,可在很大程度上提高第一链cDNA的产量。)
| 组分 | 使用量 |
| RNase free ddH2O | to 13 μL |
| Oligo (dT)18 (50 μM) or Random Primers (50 μM) or Gene Specific Primers(2 μM) |
1 μL or 1 μL or 1 μL |
| 模板RNA | Total RNA: 10 pg -5 μg或mRNA:1 pg-500 ng |
2. 逆转录反应液配制
| 组分 | 使用量 |
| 上一步的反应液 | 13 μL |
| 5×Hifair® IV Buffer | 4 μL |
| dNTP Mix(10 mM) | 1 μL |
| Hifair® IV Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 1 μL |
| RNase Inhibitor (40 U/µL) | 1 μL |
| 温度 | 时间 |
| 25℃ | 5 min |
| 50℃ | 15 min |
| 85℃ | 5 min |
2)逆转录温度:推荐使用50℃。对于高GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到55℃-60℃;
3)85℃加热5 min,目的是使逆转录酶失活。
※ 逆转录产物可立即用于后续PCR或qPCR反应,也可-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。
相关产品
| 产品名称 | 产品货号 | 产品规格 | 价格(元) |
| Hifair® II Reverse Transcriptase 第二代耐热逆转录酶 | 11110ES92/93 | 10000/5×10000 U | 626/2456 |
| Hifair® III Reverse Transcriptase 第三代耐热逆转录酶 | 11111ES92/93 | 10000/5×10000 U | 1426/4626 |
HB200221
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关专题 This method was submitted by Jim Hutchins from the University of Mississippi Medical Center. The following is a great RT-PCR protocol developed by Ignacio Rodriguez at the National Eye Institue, NIH. He gets
This method was submitted by Jim Hutchins from the University of Mississippi Medical Center. The following is a great RT-PCR protocol developed by Ignacio Rodriguez at the National Eye Institue, NIH. He gets all the credit
This method was submitted by Jim Hutchins from the University of Mississippi Medical Center. The following is a great RT- PCR protocol developed by Ignacio Rodriguez at the National Eye Institue, NIH. He gets all the credit
技术资料需要更多技术资料 索取更多技术资料









