- ￥1435 - 4635
- 翌圣生物（Yeasen）
- 14612ES
- 上海翌圣
- 2026年03月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
Hifair® Super Reverse Transcriptase（200 U/μL）
- 保质期：
18个月
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-25~-15℃保存
- 规格：
10000 U(14612ES92)/50000 U(14612ES93)
| 规格： | 10000 U(14612ES92) | 产品价格： | ￥1435.00 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50000 U(14612ES93) | 产品价格： | ￥4635.00 |
Hifair® Super Reverse Transcriptase是通过ZymeEditor定向进化平台对M-MLV进行定向改造获得的新一代逆转录酶，该酶缺乏RNase H活性，其热稳定性大幅度提高，可耐受高达70℃的反应温度，非常适合具有复杂二级结构的RNA模板的高效逆转录。
产品信息
| 货号 |
14612ES92 / 14612ES93 |
| 规格 |
10,000 U / 50,000 U |
| 单位定义 |
以Poly(A) .Oligo(dT)为模板-引物，在37℃，10 min内，将1 nmol的dTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。 |
组分信息
| 组分编号 |
组分名称 |
14612ES92 |
14612ES93 |
| 14612 |
Hifair® Super Reverse Transcriptase (200 U/μL) |
50 μL |
250 μL |
产品应用
本产品适用于RT-PCR、RT-qPCR、RT-LAMP、RNA-seq、cDNA合成等实验，逆转录反应温度最高可达70℃。
储存条件
-25~-15℃保存，有效期18个月。
使用说明
第一链cDNA合成操作步骤
1. RNA变性（此步为可选步骤，RNA变性有助于打开二级结构，可在很大程度上提高第一链cDNA的产量。）
| 组分 |
使用量 |
| RNase free ddH2O |
to 13 μL |
| Oligo (dT)18 (50 μM) or Random Primers (50 μM) or Gene Specific Primers (2 μM) |
1 μL or 1 μL or 1 μL |
| 模板RNA |
Total RNA: 10 pg - 5 μg或mRNA: 10 pg - 500 ng |
65℃加热5 min，迅速置于冰上冷却2 min。简短离心收集反应液后，加入下表中的逆转录反应液，并轻轻吹打混匀。
2. 逆转录反应体系配制（20 μL体系）
| 组分 |
使用量 |
| 上一步的反应液 |
13 μL |
| 5×reaction Buffer |
4 μL |
| dNTP Mix (10 mM) |
1 μL |
| Hifair® Super Reverse Transcriptase (200 U/μL) |
1 μL |
| RNase inhibitor (40 U/µL) |
1 μL |
3. 逆转录程序设置
| 温度 |
时间 |
| 25℃* |
5 min |
| 50-70℃ |
15-30 min |
| 85℃** |
5 min |
*当使用Random Primers时，需25℃，孵育5 min；若使用Oligo (dT)18或Gene Specific Primers，此步可省略。
**85℃加热5 min，目的是使逆转录酶失活，可根据实际情况进行设置。
逆转录产物可立即用于后续PCR或qPCR反应，也可-20℃短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-80℃保存，避免反复冻融。
注意事项
1. 请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用耗材均需保证RNase free，以防止RNase污染。
2. 所有操作均应在冰上进行，防止RNA降解。
3. 为保证高效率逆转录，建议使用高质量的RNA样本。
4. 本产品仅用作科研用途。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20240522
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文献和实验【分享】RT-PCR Protocol (Reverse Transcriptase-PCR)
Buffer B* (30 mM MgCl2 and 15 mM MnSO4) 20.0 ul dNTPs (2.5 mM each) 1.0 ul 32P-dCTP (5 uCi) 1.0 ul RNasin-Pharmacia 2.0 ul Super II RT (200 U/ul)(Gibco BRL # 18064-014) 5.0 ul Retrotherm RT (1 U/ul) (Epicentre Technologies # R19250) 16.0 ul H20
MHC I STREPTAMERS® 检测与分离抗原特异性 (CD8+ T) 细胞
浓度为 1x107cells/ 100 μl，从中取 1 - 2x106 cells； 2． 用去离子水将 10xBuffer IS 稀释为 1x，准备 3 ml 稀释后的 Buffer IS； 3．取 1ul Strep-Jactin®PE 或 Strep-Tactin®APC，0.8μl MHC I-Strep，与 1x Buffer IS 混匀为 10ul 的终体积，冰上孵育 45 分钟； 4．将上一步孵育完的 Streptamers 复合物加入到细胞悬液中轻轻吹打混匀，冰上孵育 45 分钟
by reverse transcriptase (RT)-PCR from highly specialized cells (e.g. isolated from a heterogenous sample by immunomagnetic separation). In addition, the protocol has been successfully used to isolate mRNA from a wide variety of tissues of mammalian, fish
