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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
45
- 英文名：
柱式酵母质粒 DNAout
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50 次
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
点击了解更多DNA纯化产品：
柱式酵母质粒 DNAout50 次规格详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是柱式酵母质粒 DNAout50 次规格的相关产品：
小鼠白介素23(IL23)ELISA试剂盒 ，英文名： IL23 ELISA Kit
人促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA检测试剂盒humanadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit 96T/48T
大鼠抗促甲状腺素受体抗体(Ab)免疫试剂盒 Rat thyroid stimulating hormone receptor aidoby,Ab ELISA Kit
英文名称RatPyruvateKinaseM2ELISAKit大鼠同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)规格：96T/48T
酒类精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒20次
ELISAKitLF/LTF人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白规格：48T/96T
猪血栓素A2(TXA2)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human tendon protein R (TN-R) ELISA Kit 人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA试剂盒
Rabbitadrenomedullin,ADMELISAKit 兔子肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforai-toxIgM(Humanai-toxoplasmaIgGaibody)ELISAKit人抗弓形体IgM抗体规格：48T/96T
血小板因子4(PlateletFactorIV)活性比色法定量检测试剂盒20次
Porcineiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit猪细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒规格：96T/48T
猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸检测试剂盒 48T
猪乙型脑炎病毒(JEV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
猪乙型脑炎病毒(JEV)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T
抗生素5号250g用于两性霉素B检定菌种培养
玫瑰红琼脂 250(g) incubation media 玫瑰红琼脂 250(g)
沙氏液体培养基 250g 用于真菌的增菌培养，还用于一次性使用卫生用品真菌定性检测
细菌琼脂粉250培养基原材料，培养基凝固剂incubationmedia细菌琼脂粉250培养基原材料，培养基凝固剂
WILKINS-CHALGREN琼脂 250g 用于厌氧菌的分离培养
明胶培养基(营养明胶) 规格： 250g 用途： 供鉴别测定细菌液化明胶用
营养琼脂培养基NA 规格： 250g 用途： 供细菌总数测定、保存菌种及纯培养用，也可用于消毒效果测定。(GB)
伊红美蓝琼脂培养基(EMB) 规格： 250g 用途： 用于分离肠道致病菌特别是大肠菌群和粪大肠菌群。(GB、美国FDA、USP、ISO)
乳糖胆盐培养基（含中和剂） 规格： 250g 用途： 用于化妆品粪大肠菌群的测定。(化妆品卫生规范)
柱式酵母质粒 DNAout50 次规格假单胞菌琼脂基础培养基/CN琼脂27053250g用于饮用天然矿泉水检验中铜绿假单胞菌的测定。(GB/T8538-2008)
支原体肉汤基础 (CM0403) Oxoid incubation media 支原体肉汤基础 (CM0403) Oxoid
嗜热脂肪芽孢杆菌 支/瓶
Kovacs氏靛基质试剂盒5ml*2用于吲哚(靛基质)试验
MediumP(Reinforedmediumforclostridia)
操作步骤:
1. 柱式酵母质粒 DNAout50 次规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
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文献和实验-100ul酚氯仿，剧烈振荡5-10分种后，使用氯仿抽取去除酚和蛋白，然后按照其他步骤沉淀就可以得到你的质粒 ，DNA的提取也可以使用这种方法。 2.反复冻融破壁：培养好的1ml酵母细胞在STE溶液中洗涤两次后，加入200ul缓冲液[2% Triton X-100, 1% SDS, 100 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM EDTA (pH 8.0)]，使用液氮和96-98度沸水反复冻融3-5次，然后使用酚氯仿抽提蛋白!其余步骤参考其他文献
相关专题 完美酵母质粒提取实验Protocol 问: 求教酵母 破壁的液氮研磨方法的详细步骤,需要什么试剂? 答: 取1L酵母,诱导完后,离心(centrifugation)收菌体,称湿重,用蛋白 (protein)纯化buffer悬浮菌体,重量(g):buffer体积(毫升)=1:1--1:2.用注射器将菌液加入液氮中,控制加入速度,使得菌液进入液氮中后形成小颗粒,太快容易结成块.将菌体液氮颗粒转入高速打碎器
前一阵子一直在做双酶切质粒重组，失败了很多次，不过很快改善了实验方法，用2周重组了14个质粒。现就自己的体会，谈一下质粒重组的一些个人经验。 1. 回收PCR产物： 在进行PCR扩增时候，给引物两端设计好酶切位点，一般说来，限制酶的选择非常重要，尽量选择粘端酶切和那些酶切效率高的限制酶。选好酶切位点后，在各个酶的两边加上保护碱基。 双酶切时间及其体系：需要强调的是很多人建议酶切过夜，其实完全没有必要，我一般酶切3个小时，其实1个小时已经足够。应用大体系，如100
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