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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
360
- 英文名:
T4 DNA Polymerase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50U
特别提示:包括T4 DNA聚合酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:T4 DNA聚合酶
英文名称:T4 DNA Polymerase
产品货号:YT403
产品规格:50U
本品是一种模板依赖的DNA聚合酶,可以在结合有引物的单链DNA 模板上,从5"→3"方向催化DNA合成反应。T4 DNA Polymerase具有3"→5"外切酶活性,但不具有5"→3"外切酶活性。
特点:T4 DNA Polymerase由于同时具有5"→3"DNA聚合酶活性和3"→5"DNA外切酶活性,可以用于将5"端突出末端补平或3"端突出末端削平。T4 DNA Polymerase的3"→5"DNA外切酶活性对于单链DNA要比双链DNA活性更高,即单链DNA要比双链DNA中的非配对链部分更容易被T4 DNA Polymerase所消化。T4 DNA Polymerase的3"→5"外切酶活性比Klenow Fragment要高约200倍。
用途:
1)T4 DNA Polymerase可用于催化以下反应;
2)DNA 5"或3"突出末端的平滑化;
3)通过置换反应进行标记DNA探针合成;
4)定点突变过程中第二链的合成;
5)不依赖于连接反应的PCR产物克隆。
来源:本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义:37℃30分钟时间内,催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件:67mM Tris-HCl(pH8.8),6.7mM MgCl2,1mM DTT,16.7mM(NH4)2SO4,0.2mg/ml BSA,0.033mM of each dNTP,0.4MBq/ml[3H]-dTTP,0.2mM 热变性且经DNA酶部分消化过的小牛胸腺DNA。
纯度:不含DNA内切酶,不含RNase。
酶储存溶液:20mM potassium phosphate(pH7.5),200mM KCl,2mM DTT,and 50% glycerol。
Reaction Buffer(5X):335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃),33mM MgCl2,5mM DTT,84mM (NH4)2SO4。
缓冲液兼容性:在百奥莱博的内切酶反应缓冲液1X O、1X R、1X Y、2X Y中的活性为100%,在1X B、1X G中的活性为75-100%。
失活或抑制:70℃加热10分钟可使T4 DNA Polymerase失活。金属离子螯合剂可以抑制T4 DNA Polymerase的活性。
储存条件:-20℃
除了T4 DNA聚合酶,,我公司还供应以下相关产品:
名称:AgeI-HF限制性内切酶
货号:SV0030
规格:1,500U|300U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
名称:NdeI限制性内切酶
货号:SV0529
规格:20KU|4KU|2KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 75%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 DNA CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
对标准小量制备的 DNA 切割率较低。
名称:Nb.BbvCI切刻内切酶
货号:SV0809
规格:5KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
名称:8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶 Fpg
货号:SV1110
规格:2500U|500U
特性:
单细胞凝胶电泳(彗星试验)
碱性析出
碱解旋
概述:
Fpg(甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶)也称作 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶,既有 N-端糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-端糖基化酶活性可以切下双链 DNA 上受损的嘌呤碱基,产生一个脱嘌呤(AP)位点。AP-裂解酶活性可以切割 AP 位点的 3´ 或 5´ 端,因此可以除去 AP 位点,产生一个具有 3´ 和 5´ 磷酸的碱基缺口。
被 Fpg 识别并切除的受损碱基包括:7,8-二羟基-8-氧代鸟嘌呤(8-氧代鸟嘌呤)、8-羟基腺嘌呤、fapy-鸟嘌呤、甲基-fapy-鸟嘌呤、fapy-腺嘌呤、黄曲霉毒素 B1-fapy-鸟嘌呤、5-羟基-胞嘧啶和 5-羟基尿嘧啶。
来源:
克隆有 fpg 基因的重组 E. coli 菌株。
反应条件:
1X BalbBuffer 1.1
[10 mM Bis Tris *烷-HCl,10 mM MgCl2 ,100 μg/ml BSA(pH 7.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:60℃ 加热 10 分钟。
质保声明:
8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶经过严格的质控检测,确保该产品具有zuì高的活性和纯度。详情请联系我们咨询。
单位定义:
1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃条件下, 1 小时内能够切割 1 pmol 含单个与胞嘧啶配对的 8-氧代鸟嘌呤的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
彗星试验的推荐稀释倍数
1:103~1:104。详细步骤请联系我们咨询。
浓度:
8,000 units/ml。
名称:DNA拓扑异构酶I
货号:JN0079
规格:50U
本酶可催化4种反应:
1、催化负超螺旋DNA的松弛。
2、在单链环状DNA分子内形成绳结(Knotting)和解开绳结(Unknotting)。
3、催化具有互补碱基序列的环状单链DNA形成双链闭环状DNA分子。
4、两个环状双链DNA分子之中的一个存在DNA链的切口时,发生两个分子的连结反应(Catenation)或者逆反应(Decatenation)。
完整的DNA 拓扑异构酶 I(E.coli)全酶是一分子量97kDa的蛋白。本制品是把topA基因(E.coli)在大肠杆菌中进行表达后,经多次纯化分离而得到的。
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:一个单位定义为在25μl反应体系,37℃15分钟条件下,能催化>95% 的0.5 μg pUC19 RF I型 (负超螺旋)DNA的解旋所需要的酶量。DNA超螺旋化通过不含EB的琼脂糖凝胶电泳来检测。
热失活:65℃,20分钟可使40units的酶失活。
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文献和实验PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应,对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么,对于 PCR 反应的核心成份,DNA 聚合酶,你选对了吗? 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等,常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分,高保真聚合
7- 3D Assay in Matrigel : S1, T4-2, T4-2R
up pellet.? S1 cells 1.0 x 106 cells/1.2 ml matrigel T4-2. 0.7 x 106 cells/1.2 ml matrigel. T4-2 +AIIBII 0.7 x 106 cells/1.2 ml matrigel
作用,当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3'→5'外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸。在某些T4噬菌体突变株中DNA复制的真实性降低,而易发生突变,从此突变株分离得到的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性很低。相反,另外一些具有抗突变能力的T4突变株中的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性比野生型高得多,因此,其DNA复制真实性好,变异率低。可见,3'→5'外切
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