Taq DNA聚合酶优惠

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应Taq DNA聚合酶优惠，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：Taq DNA聚合酶优惠
编号：BTN51206
规格：500U
英文名：Taq DNA Polymerase
品牌：百奥莱博
产地：北京
本产品是Thermus aquaticus(水生栖热菌)的DNA聚合酶基因在E. coli中表达而得,具有以双链DNA为模板的5´→3´聚合酶活性和5´→3´外切酶活性。Taq DNA聚合酶长为832个*基酸，分子量为94 Kd。该酶可以广泛用于PCR，RT-PCR，加尾反应等。

产品特点：
1．耐热DNA聚合活性，该酶在90℃以上几乎无DNA合成，在75～80℃时延伸率约150个核苷酸，70℃时为60个核苷酸/秒，55℃时为24个核苷酸/秒。在65～68℃并有Mn2+存在时还具有逆转录活性。
2．热稳定，在PCR混合物中95℃保温40分钟仍可保持50%的活性。
3．Mg2+离子依赖性，MgCl₂浓度在2.0mM时该酶催化活性最高。
4．本酶无3´→5´外切活性，不具3´→5´校对功能，碱基错配机率为2.1×10⁻⁴。

产品组成：

 

成分	规格
Taq DNA聚合酶(5U/μL)	20μl
10×PCR Buffer(含Mg2+)	1ml
MgCl2，25mM	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：(以λDNA为模板进行PCR扩增反应为例)

1．按下列组份配制PCR反应液。

Taq DNA聚合酶(5U/μl)	0.25μl
10×PCR Buffer(含Mg2+)	5μl
MgCl₂(25mM)	根据需要补加
自备dNTP(各2.5mM)	4μl
模板DNA	见下
引物1(20μM)	1μl
引物2(20μM)	1μl
灭菌蒸馏水	Up to 50μl

注：10×PCR Buffer含15mM MgCl2(在PCR体系中的终浓度为1.5mM)，是否需要补加MgCl2根据实验决定。但一般不需要补加。
推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量

哺乳动物基因组DNA	0.5-1μg
酵母基因组DNA	5-500ng
细菌基因组DNA	0.5-50ng
质粒DNA	5-500pg
PCR回收片段	1-100pg

2．PCR反应条件
以λDNA为模板，扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下：

注：PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

注意事项：
PCR的反应液请在冰中配制，然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法可增强PCR扩增的特异性，减少PCR过程中的非特异性反应，能得到良好的PCR结果。

欲咨询购买Taq DNA聚合酶优惠，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·盐*(代"酸")万古霉素溶液
编号：BTN120703
英文名称：Vancomycin Hydrochloride Solution
规格：10mL
本产品为浓度为50mg/mL的盐*(代"酸")万古霉素溶液。盐*(代"酸")万古霉素(万古霉素盐*(代"酸")盐；Lyphocin；Vancor)，分子式：C66H76Cl3N9O24，分子量：1485.67，CAS号：1404-93-9。

作用机制：盐*(代"酸")万古霉素为窄谱抗生素，仅对革兰阳性菌有效。其作用机制是抑制细菌细胞壁的合成，它主要和细菌细胞壁结合，而使某些*基酸不能进入细胞壁的糖肽中。多用于在万古霉素-肽络合物中键强度的研究和植物细胞培养试验。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期6个月。

·蓝色DNA上样液，6×
编号：BTN3690B
英文名称：DNA Loading Buffer(Blue)
规格：10mL
DNAload可以作DNA上样液用,含甘油和红色染料(BTN3690A)或蓝色染料(BTN3690B),便于直接上样和观察电泳进程。含红色染料的3690A还可以直接加到PCR反应体系中，不会干扰PCR反应，PCR结束后可以直接电泳，其红色染料泳动速度与50bp DNA片段相当，对绝大多数PCR片段的观察不会造成干扰，尤其适用于长度在2 Kb以下的DNA片段的电泳。含蓝色染料的BTN3690B其染料为*酚兰和二甲*蓝，适合于基因组合DNA和其他大片段DNA的电泳。本产品与TAE、TBE和百奥莱博的超快电泳缓冲液SuperBuffer-2 兼容。

试剂盒组成：

成分	10mL(A)	10mL(B)
RNAep	10ml(红色)	10ml(蓝色)
说明书	1份	1份

储存条件：常温运输，4℃(短期)或-20℃(长期)保存有效期一年。

使用方法：

DNA电泳(对BTN3690A和BTN3690B)
DNAload 为6×浓缩液，按5:1的比例将DNA样品与本产品混合(如10μl DNA样品+2μl 本产品)，直接上琼脂糖凝胶电泳(以TAE或TBE 为电泳缓冲液)，根据胶的大小选择合适的电压进行电泳，电泳完毕后可直接将凝胶放在紫外灯下观察结果。

加入PCR中使用(仅对BTN3690A)
DNAload 为6×浓缩液，如果加入到PCR 体系中，需要使其终浓度为1×，具体用量需要根据PCR 体积决定，PCR结束后直接上样电泳。注意：不能将3690B 加到PCR 体系中，因为其染料抑制Taq DNA聚合酶活性。


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·ONPG干粉
编号：BTN131108
英文名称：o-nitrophenyl-β-Dgalactopyranoside
规格：1g
ONPG是在包含β-半乳糖苷酶(β-Gal)报告酶的ELISA 应用中最经常使用的化学显色底物。该酶-底物反应生成黄色产物，在420nm 有最大吸收，且405nm处强度也很高(与常用的酶标仪滤镜设置匹配)。其反应原理如下：


储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·百万碱基级动物DNA提取试剂盒
编号：BTN130929
英文名称：Animal DNA extraction kit(Million base pairs)
规格：10次
ONPG是在包含β-半乳糖苷酶(β-Gal)报告酶的ELISA 应用中最经常使用的化学显色底物。该酶-底物反应生成黄色产物，在420nm 有最大吸收，且405nm处强度也很高(与常用的酶标仪滤镜设置匹配)。其反应原理如下：


储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·DTT(蛋白级)
编号：BTN131053
英文名称：DTT，Protein Grade
规格：5g
本产品是用于还原蛋白质二硫键的水溶性试剂。维持单硫醇的还原状态并可定量还原二硫键。 使用DTT和Ellman 试剂可以特异、灵敏地分析二硫键。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·T7 RNA聚合酶
编号：BTN120310
英文名称：T7 RNA Polymerase
规格：1000U
T7 RNA聚合酶是一种高度特异识别T7启动子序列的DNA依赖的5´→3´RNA聚合酶，它可以催化单链或双链DNA T7启动子下游NTP的掺入，合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。

产品特点：
1．对于T7启动子有高度的特异性，用于体外RNA(含小RNA)的合成。
2．能识别修饰的NTP(生物素标记、地高*(代"辛")标记、荧光素标记的NTP)，可用于标记探针。
3．所得RNA可用于下列后续实验：核酸杂交、基因组DNA序列分析、核糖核酸酶保护测定、反义RNA合成，体外翻译，RNA剪接、RNA二级结构分析、RNA-蛋白质相互作用、核酸扩增、siRNA、miRNA等小RNA。

产品组成：

成分	规格
T7 RNA聚合酶(20U/μL)	50μl
5×反应缓冲液	250μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、制备DNA模板(本试剂盒不含所需试剂，此处信息仅供参考)
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板，但是必须注意以下几点。
⑴必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA，则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。
⑵ 需要转录的DNA序列的上游必须有T7启动子。如果模板是PCR产物，则可以在设计引物时将T7启动子序列(5´TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG 3´)加上。如果是将DNA片段克隆到载体上，则需要选择有T7启动子的载体，并且克隆位点必须位于T7启动子下游。
⑶ 需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(比如选择了Pst I来线性化质粒)，则最好用T4 DNA聚合酶修平。
⑷必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A，因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染，所以在用作模板前，最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温，然后电泳检测RNA是否被降解，以此来判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。

二、体外转录反应(本试剂盒不含除酶和反应液之外的相关试剂)
1．在一个RNase-free的塑料离心管中，在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分：

成分	加入量	备注
DNA模板		如果使用质粒DNA,必须反复酚-*仿抽提去除残留的RNase,然后再乙醇沉淀质粒DNA
PCR片段	50ng左右
质粒DNA	1μg左右
RNase抑制剂
5×反应缓冲液	4μl	需室温时使用
NTP(2.5mM each)	4μl
T7 RNA聚合酶	0.5-1μL
RNase-free水	补水到20μL

注：此为20μL反应体系的用量，对其他反应体系，各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针，则需要订购NTP分开的试剂盒。如果需要得到加帽RNA，则需要加入自备的加帽修饰核苷酸。
2．37℃保温1-2小时。
 注意：延长保温时间并不能提高产量。
3．70℃加热10分钟灭活T7 RNA聚合酶。
4．取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成5-10μg的RNA。
5．得到的RNA可以放-80℃保存。

三、如果需要去除DNA模板(仅产品不提供所需试剂)
1．在体外转录体系中加入1μL自备的RNase-free DNase(3-5U/μL)。
2．37℃保温15-30分钟。
3．补水到100μL。
4．用自备的等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5．加200μL微量核酸沉淀剂(用前需要摇晃混匀)，振荡后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
6．加入1mL 75%乙醇，震荡10秒后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
7．短暂离心数秒，用枪头吸弃上清。晾干，所得沉淀即体外转录所得的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。


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·硅胶膜离心吸附柱系列(小量提取)
编号：BTN60911
英文名称：Silica Spin Column for Miniprep
规格：50套
硅胶膜离心吸附柱目前广泛用于基因组DNA提取、总RNA提取、DNA反应纯化、DNA胶回收和质粒DNA制备等分子生物学实验，但是由于硅胶膜吸附核酸的能力千差万别(详细分析见百奥莱博综述Silica-DNA结合原理及影响因素)，使得市场上相关产品的质量也良莠不齐。百奥莱博经过精心研究，找到特殊的化学修饰方法，使普通硅胶膜吸附核酸的能力大为增加，好于市场上绝大多数产品。本产品就是基于化学修饰硅胶膜的微型离心吸附柱。

产品特点：
1.高载量，在同等上样条件下吸附能力比同类产品高1-2倍左右。
2.上样体积为0.7mL。
3.与各种常用的，基于Silica-DNA结合原理的上柱液和洗柱液兼容。
4.可以再生使用(需要百奥莱博的离心吸附柱再生液)。
5. 结合DNA的性能不会随放置的时间变化。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

使用效果：

图注: 本产品(T)和国内杭州V公司离心吸附柱(V)用于从1.5mL E.coli菌液中提取pGEM3质粒DNA(使用百奥莱博柱式质粒DNA提取试剂盒试剂)，最后用100μl TE洗脱质粒DNA，5μl用于电泳。

图注: 本产品(左)和上海S公司离心吸附柱(右)用于从玉米叶片中提取总RNA。洗脱量为100μl，10μl用于甲醛胶变性电泳。

北京百莱博科技有限公司是工具酶产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购Taq DNA聚合酶优惠。