- ￥110
- 万生昊天/WSHT
- 美国
- EZWB04-3
- 2026年01月26日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃
- 保质期：
2个月
- 英文名：
WB Blocking Buffer (Nylon membrane)
- 库存：
100
- 供应商：
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格：
100ml
Western封闭液即Western Blocking Buffer，可用于Western时转移了蛋白样品的尼龙膜的封闭主要由TBS、封闭剂、防腐剂、antifoam A等组成，封闭后可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合，降低背景，增强信噪比。每张膜封闭大约需要5-10ml封闭液。
保存条件：4℃保存，3个月有效。
注意事项：
使用说明：
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文献和实验① 膜封闭时间不够，室温下通常摇床孵育膜 1h，出现这种情况可以更换合适的封闭液或者适当延长封闭的时间； ② 抗原抗体免疫过程中一抗稀释度太高，可以多设置几组一抗浓度，摸索最适宜的抗体稀释度； ③ 在整个实验过程中膜发生干燥或手套反复接触过也会发生背景值高的情况，因此实验过程中要注意保持膜的湿润，使用镊子夹取膜。 3、WB 结果中有杂带干扰 ① 抗体纯度不高会产生非特异性条带影响结果，高纯度抗体条带特异性更好，建议更换抗体； ② 一抗浓度过高，降低一抗稀释比，目的条带和杂带可能会减弱
使用寿命（抗体并非绝对不可以冻融；只是高浓度的原始管抗体的冻融对效价会有较大影响）。抗体稀释液（一抗、二抗稀释液也可同也可不同）和封闭液可以相同，可以不同，因为抗体稀释液可以采用复方的，所以即使混合了少许，不会对抗体的使用产生较大的影响。不过封闭液用milk时，gelatin稀释的一抗混入少许milk会影响其使用寿命。由于以上诸多可变因素，实在无法总结出一种万金油式的抗体稀释液（只能是多数通用），因此对待具体问题时，请具体对待（多花点心思摸索吧）。
相信很多人在做 Western blot 实验时，会遇到各式各样奇怪的现象，为了让大家少走弯路，下面就跟大家来分享一下实验过程中会出现哪些现象，是什么原因，如何来解决。以下列举的情况可都是我们的实验员在多次实验中所积累的真实经验，内容文字少，全是干货。1. 出现黑点或黑斑原因：试剂污染，抗体结合到封闭剂解决方法：使用新鲜配置的试剂；过滤封闭液；选用其他类型封闭液2. 条带中出现边缘规则的白圈原因：转膜时膜和胶中间有气泡，或抗体在膜上未均匀分散解决方法：制备转膜凝胶时用玻棒赶去气泡；使用摇床孵育
