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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
WB Blocking Buffer (BSA)
- 库存:
100
- 供应商:
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格:
100ml
Western封闭液即Western Blocking Buffer,可用于Western时转移了蛋白样品的PVDF膜或NC膜(硝酸纤维素)的封闭主要由TBS、封闭剂、防腐剂、antifoam A等组成。封闭后可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合,降低背景,增强信噪比。每张膜封闭大约需要5~10ml封闭液。
保存条件:4℃保存,6个月有效。
注意事项:
使用说明:
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文献和实验① 膜封闭时间不够,室温下通常摇床孵育膜 1h,出现这种情况可以更换合适的封闭液或者适当延长封闭的时间; ② 抗原抗体免疫过程中一抗稀释度太高,可以多设置几组一抗浓度,摸索最适宜的抗体稀释度; ③ 在整个实验过程中膜发生干燥或手套反复接触过也会发生背景值高的情况,因此实验过程中要注意保持膜的湿润,使用镊子夹取膜。 3、WB 结果中有杂带干扰 ① 抗体纯度不高会产生非特异性条带影响结果,高纯度抗体条带特异性更好,建议更换抗体; ② 一抗浓度过高,降低一抗稀释比,目的条带和杂带可能会减弱
那么如何通过改变抗体稀释液的配方,寻求抗体孵育的最佳条件呢?首先要认清,抗体稀释液没有一个绝对通用的配方;一种抗体一个脾气。其次,抗体稀释液的配方要兼顾与特异性抗体竞争抗原的强度,以及对其他区域的封闭强度两方面的平衡。目前,抗体稀释液中可以充当封闭蛋白的主要有milk,BSA和gelatin,似乎很少的样子 。。。可是,你有没有考虑过“复方”?--这下配方无限多了吧。1. 采用milk,BSA和gelatin的单方。3% milk,5% BSA,2.很多情况下单方的浓度很高了,背景问题仍不能
它们都是BSA A、请问各位高手,在进行免疫荧光的实验时,浸一抗之前,要用的封闭液中1%的BSA是怎么配制? 封闭液封闭后还用PBS 清洗干净再浸一抗吗? 1.可以直接用0.02M的PBS 配制 2.不用PBS 清洗干净,直接浸一抗。 B、各位高手,间接法中我想摸索封闭液BSA的最佳浓度,用抗原 包被后,用不同浓度的BSA(0.5%,1%,2%,3%)封闭,其他条件固定,测得 OD450nm后,可以看出随着BSA浓度








