- ¥70
- 万生昊天
- EZWB06-2-50
- 2025年12月25日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃保存，6个月有效
- 规格：
50ml
Western二抗稀释液(Secondary Antibody Dilution Buffer)可用于免疫印迹中的二抗的稀释和配制。经Western二抗稀释液稀释的二抗可以在1~2周内重复使用3~4次。
产品组成：
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编号
名称 |
EZWB06-2-50 |
| Western二抗稀释液 | 50ml |
保存条件：
4℃保存，6个月有效。
注意事项：
1、 为了能使抗体可以反复多次使用， 建议尽量在4℃条件下进行二抗和蛋白膜的结合反应，以减缓二抗的衰减速度。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1、 根据所用二抗的使用说明以及二抗的效价和目的蛋白的含量，按照适当比例(如1:1000、1:500等比例)稀释二抗。
2、 二抗稀释后即可直接用于孵育抗体。一次Western结束后，可以回收稀释的二抗，4℃保存，用于下次的Western，通常在1~2周内可以重复使用3~4次。
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文献和实验台面上，四角用水浸湿以使保鲜膜保持平整；将抗体溶液加到保鲜膜上；从封闭液中取出膜，用滤纸吸去残留液后，将膜蛋白面朝下放于抗体液面上，掀动膜四角以赶出残留气泡；室温下孵育 1～2 h 后，用 TBST 在室温下脱色摇床上洗两次，每次 10 min；再用 TBS 洗一次，10 min。 3. 同上方法准备二抗稀释液并与膜接触，室温下孵育 1～2 h 后，用 TBST 在室温下脱色摇床上洗两次，每次 10 min；再用 TBS 洗一次，10 min，进行化学
BSA 蛋白标准液、BCA 试剂、PBS。 1) 标准曲线：用 BSA 和 PBS 混合总体积为 20 μL 的溶液做标准曲线，具体操作如下:按照 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 含量稀释 BSA 蛋白标准品，每个浓度（0、4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μLBSA，其余用 PBS 补齐至 20 μL）梯度做一个复孔。 2) 样品稀释测蛋白浓度：10 倍稀释法：取 18 μLPBS+2 μL 样品上清（经上步处理的样品 12000 r/min 离心 5 min
2 hrs，或4 ℃ 过夜。封闭完用TBST 冲洗5 sec。用吸水纸吸去残余液。 II 一抗孵育：按照一抗说明书的推荐比例稀释一抗，使用TBST 或封闭液稀释。在一容器中，将PVDF 膜浸没在抗体溶液里，室温下2 hrs 或4 ℃ 过夜，摇床缓慢摇匀。 III 一抗孵育完后，用TBST 室温下在摇床上洗3 次，每次10 min。 IV 二抗孵育：同上方法准备二抗稀释液并与膜接触，室温下摇床缓慢摇匀1 -2 hrs。 V 二抗孵育完后，用TBST 室温下在摇床上洗3 次，每次10 min
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