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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
12个月
- 英文名:
WB 转膜缓冲粉剂
- 库存:
100
- 供应商:
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格:
1L
Western转移缓冲液又称蛋白印迹转移缓冲液或转膜缓冲液,适用于Western Blot实验中把蛋白质转移到PVDF膜或硝酸纤维素(NC)膜上,以便进行抗体的孵育和下游实验。
万生昊天Western转移缓冲粉剂主要成分为Tris、甘氨酸等,不含甲醇,主要用于蛋白质转移到PVDF膜或硝酸纤维素(NC)膜,不适用于把蛋白质转移到尼龙膜上。该试剂为粉剂,溶解于去离子水后使用。
保存条件:
室温保存,24个月有效。
注意事项:
- 密闭保存,开启后尽快用完。
- 尽量选择优级甲醇,分析纯甲醇也可使用。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
- 取1L包装的Western转移缓冲粉剂,充分溶解于dH2O,即为1X Western转移缓冲液。
- 按1X Western转移缓冲液:无水甲醇=4:1的比例Western转移配制工作液。大多数情况下取1X Western转移缓冲液480ml加入120ml甲醇即可。
- 大多数蛋白质转移,应置于4℃进行,以防止蛋白降解。
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文献和实验最近师妹开始做 WB 实验了,但是一天又一天重复做,却次次结果不理想。除了没有拿到组会可以汇报的条带外,师妹集齐了所有奇奇怪怪的条带:微笑带,皱眉带,拖尾带,甚至没有条带…… 师妹也因此对我发出了灵魂拷问:「为什么 WB 实验这么容易翻车?」 虽然 WB 是一类基础实验,但是基础并不代表简单。翻车的主要原因在于 WB 的步骤实在繁琐:从配置蛋白胶开始,到蛋白电泳、蛋白转膜、抗体孵育,一整套流程下来花费 1~2 天的时间才能进行最后的显影。这些环节中但凡有一个出错,就会导致实验
「救命!做 WB 蛋白样品提取时,样品加入裂解液,离心后发现管里有很多的胶状物,非常粘稠,有点像鼻涕!多加裂解液稀释一下仍然没有效果,蛋白浓度还变得很低。不死心的我把它戳出来玩了一会,戳戳戳仍然是一大团,这粘稠物是什么?对我的后续实验会有什么影响?」 当你看到这团粘稠的「鼻涕」,就意味着你即将经历下面五个难题的考验: 1. 样品吸液困难 堵塞移液器:离心后吸上清液的时候胶状物会堵塞移液器头,移液后上清液所剩无几。 无法分离上清液:样品太
条件至关重要。1. 转膜时间2. 转膜过程环境温度3. 转膜缓冲液使用次数4.转膜缓冲液中甲醇比例(v/v)(三)一抗使用* 使用 IRS1(150kDa)、pPERK(125kDa)和内质网应激 XBP1(29/55kDa)抗体等检测小鼠肝组织探讨一抗在多种条件下对结果影响(IRS1,pPERK 和 XBP1 用于 WB 检测难以出现清晰条带,因此选择合适的一抗及孵育条件就很关键)。1. 一抗稀释溶剂2. 一抗稀释比例3. 一抗孵育时间(四)二抗使用* 高浓度的二抗会导致大量非特异性结合,造成 WB







