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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
12个月
- 英文名:
WB Transfer Buffer, (NC,PVDF)
- 库存:
100
- 供应商:
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格:
1X,500ml/5X,500ml/10X,500ml
| 规格: | 1X,500ml | 产品价格: | ¥40.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5X,500ml | 产品价格: | ¥70.0 |
| 规格: | 10X,500ml | 产品价格: | ¥100.0 |
Western转膜缓冲液又称蛋白印迹转移缓冲液或转移缓冲液,主要由Tris、甘氨酸等组成。适用于Western Blot实验中把蛋白质转移到PVDF膜或硝酸纤维素(NC)膜上,以便进行抗体的孵育和下游实验。不适用于把蛋白质转移到尼龙膜上。
保存条件:4℃保存,3个月有效。
注意事项:
使用说明:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| EZWB07-2-1X | 转膜缓冲液(NC,PVDF) | 500ml |
| EZWB07-2-5X | 500ml | |
| EZWB07-2-10X | 500ml |
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文献和实验条件至关重要。1. 转膜时间2. 转膜过程环境温度3. 转膜缓冲液使用次数4.转膜缓冲液中甲醇比例(v/v)(三)一抗使用* 使用 IRS1(150kDa)、pPERK(125kDa)和内质网应激 XBP1(29/55kDa)抗体等检测小鼠肝组织探讨一抗在多种条件下对结果影响(IRS1,pPERK 和 XBP1 用于 WB 检测难以出现清晰条带,因此选择合适的一抗及孵育条件就很关键)。1. 一抗稀释溶剂2. 一抗稀释比例3. 一抗孵育时间(四)二抗使用* 高浓度的二抗会导致大量非特异性结合,造成 WB
液0.1%TBST)(五)一、二抗孵育后TBST洗涤时间*一抗和二抗孵育后TBST洗涤时间和次数会影响背景深度。一张漂亮的 WB 结果受多个关键因素影响,以上对比实验给出显示最核心的影响因素是一抗选择和合适的转膜条件。对于一抗而言,选择具有一定文献引用数的品牌不仅更容易得到清晰可信的结果同时更能够得到同行认可。其二,针对特定分子量大小靶蛋白而选择适当转膜条件(转膜时间,转膜缓冲液和必要低温环境)能够将 SDS-PAGE 胶上蛋白样品尽可能完全转移到PVDF膜上,同时减少蛋白不必要降解,这对于最终
,特别适合于蛋白印迹 。 就韧性而言:尼龙膜较强;硝酸纤维素膜较脆,易破碎;PVDF膜较强。 就重复性而言:尼龙膜可反复用于分子 杂交,杂交后,探针分子可经碱变性被洗脱下来;硝酸纤维素膜(NC膜)不能重复使用;PVDF膜可以重复使用。 Western Blot时该选择NC膜还是PVDF膜? 硝酸纤维素膜:硝酸纤维素膜(NC膜)是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲 液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和







