RNase 抑制剂 ( 人源 )400U说明书

实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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RNase 抑制剂 ( 人源 )400U说明书详细介绍：

公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是RNase 抑制剂 ( 人源 )400U说明书的相关产品：
Rosetta(DE3) 感受态细胞0.1mL×10  暗盒 (5×7 英寸 )1个
Rosetta(DE3)pLysS 感受态细胞0.1mL×10  氨基磁珠2mL
Rosetta-gami(DE3) 感受态细胞0.1mL×10  氨苄青霉素溶液 ,50mg/mL10mL
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞0.1mL×10  氨苄青霉素干粉1g
Tuner(DE3) 感受态细胞0.1mL×10  φX174RF Ⅱ DNA30μg
miRNA 电泳分子量标准30 次  鸟类种属鉴定 PCR Mix100 次
微量 RNA 助沉剂0.1mL  尼龙膜，13×20cm1张
微量 DNA 助沉剂0.1mL  内皮细胞生长因子5mL
DNA 级 Acryl 助沉剂1mL  内毒素清除专用亲和介质5mL
彩色 Acryl 助沉剂1g  内毒素清除专用亲和介质50mL
凝胶法 miRNA 分离试剂盒 50 次  柱式腐殖酸清除剂30 次
一站式大提柱式 miRNAout5次  柱式腐殖酸清除剂100 次
一站式动物 mRNAout25 次  柱式粪便 RNAout50 次
一站式全血 mRNAout25 次  柱式粪便 DNAout50 次
一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒50 次  柱式分枝杆菌 RNAout50 次
6.5%氯化钠肉汤  英文名称；  6.5% NaCl Broth  规格；  250g
KEA琼脂（不含糖）  英文名称；  KEA Agar  规格；  250g
KEA肉汤  英文名称；  KEA Broth  规格；  250g
pH9.6葡萄糖肉汤  英文名称；  pH9.6 Dextrose Broth  规格；  250g
改良爱德华琼脂基础  英文名称；  Edwards Medium,Modified  规格；  250g
庆大霉素琼脂  Gentamycin Agar  250g
我妻氏培养基基础  Wagstsuma Agar Base  250g
60g/L氯化钠蛋白胨肉汤  60g%/L NaCl Peptone Water  250g
氯化钠三糖铁琼脂  NaCl Triple Sugar Iron Agar  250g
胰胨大豆琼脂斜面（TSA）  Tryptic Soy Agar  250g
RNase 抑制剂 ( 人源 )400U说明书含225ml碱性蛋白胨水均质袋  用于霍乱弧菌的选择性增菌培养用于霍乱弧菌的选择性增菌培养
含225ml蒸馏水均质袋  用于样品的制备或稀释用于样品的制备或稀释
含250mlPreston肉汤均质袋(双料)  用于空肠弯曲菌的培养用途：用于空肠弯曲菌的培养规格:250ml/袋*10保存:2-8℃有效期:一年
即用型无菌管装液体培养基
操作步骤:
1. RNase 抑制剂 ( 人源 )400U说明书匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。