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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
59
- 英文名:
一站式 TA 克隆试剂盒
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
20 次
(1) 一站式 TA 克隆试剂盒20 次说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是一站式 TA 克隆试剂盒20 次说明书的详细介绍点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品:

储存事项:
A. 一站式 TA 克隆试剂盒20 次说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 一站式 TA 克隆试剂盒20 次说明书组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
Rosetta(DE3) 感受态细胞0.1mL×10 暗盒 (5×7 英寸 )1个
Rosetta(DE3)pLysS 感受态细胞0.1mL×10 氨基磁珠2mL
Rosetta-gami(DE3) 感受态细胞0.1mL×10 氨苄青霉素溶液 ,50mg/mL10mL
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞0.1mL×10 氨苄青霉素干粉1g
Tuner(DE3) 感受态细胞0.1mL×10 φX174RF Ⅱ DNA30μg
miRNA 电泳分子量标准30 次 鸟类种属鉴定 PCR Mix100 次
微量 RNA 助沉剂0.1mL 尼龙膜,13×20cm1张
微量 DNA 助沉剂0.1mL 内皮细胞生长因子5mL
DNA 级 Acryl 助沉剂1mL 内毒素清除专用亲和介质5mL
彩色 Acryl 助沉剂1g 内毒素清除专用亲和介质50mL
凝胶法 miRNA 分离试剂盒 50 次 柱式腐殖酸清除剂30 次
一站式大提柱式 miRNAout5次 柱式腐殖酸清除剂100 次
一站式动物 mRNAout25 次 柱式粪便 RNAout50 次
一站式全血 mRNAout25 次 柱式粪便 DNAout50 次
一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒50 次 柱式分枝杆菌 RNAout50 次
伯顿毕赤酵母 产朊假丝酵母
生孢梭菌冻干粉 红平红球菌
棉花立枯菌 紫色小单孢菌(绛红小单孢菌)
伴放线放线杆菌 多粘芽孢杆菌
顶头孢霉 皱褶假丝酵母
发光假蜜环菌 苏云金芽胞杆菌以色列亚种 Bacillus thuringiensis subsp. israelensis
费氏志贺氏菌(福氏志贺氏菌) 鲁氏毛霉
黑曲霉菌CMCC98003冻干粉 侧耳
斯氏油脂酵母 营养琼脂培养基200ml
沙门氏菌IV 裂殖壶菌
一站式 TA 克隆试剂盒20 次说明书红曲霉菌 罗伊氏乳杆菌
蜜环菌 海枣曲霉
蜡样芽孢杆菌冻干粉 泡盛曲霉烟色变种
焦曲霉 裂皮侧耳
盲肠肠球菌 成团肠杆菌
服务流程:
1)一站式 TA 克隆试剂盒20 次说明书客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
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