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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
43
- 英文名：
一站式全血 mRNAout
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
25 次
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
点击了解更多RNA纯化产品：
一站式全血 mRNAout25 次费用详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是一站式全血 mRNAout25 次费用的相关产品：
NAC( 抗氧化剂 )2g AICAR(AMPK 激活剂 )5mg
Nicotinamide(Sirt1 抑制剂 )10g AH109 酵母感受态细胞10×100μL
Nocodazole( 有丝分裂抑制剂 )5mg AGL1 农杆菌感受态细胞10×100μL
NS-2028(sGC 抑制剂 )1mg AG490(JAK 抑制剂 )5mg
NS-398(COX-2 抑制剂 )1mg AEBSF 溶液，10mg/mL5mL
PCR 抑制物清除剂1mL 天净沙 Ribo-SPIA cDNA 扩增试剂盒20 次
PCR 污染清除剂500mL 陶瓷研钵 ( 直径 75 mm)1个
硅胶膜离心吸附柱系列 ( 小提 )50 套 陶瓷研钵 ( 直径 60 mm)1个
硅胶膜离心吸附柱 ( 小提 ) 收集管50 只 糖蛋白染色试剂盒10 次
硅胶膜 DNA 离心吸附柱 ( 大提 )1套 糖蛋白蛋白纯化试剂盒50 次
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 3.09 mL
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 3.01 mL
DAB 法生物素杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 2.0 9 mL
TMB 法生物素杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 2.0 1 mL
ECL 法生物素杂交检测试剂盒5次 环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次
茜素-β-半乳糖苷肉汤（Aliz-gal肉汤） 英文名称； Aliz-gal Broth 规格； 100g
营养琼脂（琼脂20g） 英文名称； Nutrient Agar（Agar 20g） 规格； 250g
缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR-VP试验用培养基） 英文名称； Methyl Red Voges Proskauer Broth 规格； 250g
去氧胆酸盐枸橼酸盐乳糖蔗糖琼脂 英文名称； DCLS Agar 规格； 250g
Honda氏产毒肉汤 英文名称； Honda Toxin-Producing Broth 规格； 250g
三糖铁（TSI）琼脂 TSI Agar 250g
革兰氏染色液 Gram Staining 5ml*8
山梨醇麦康凯琼脂添加剂 Sorbitol MacConkey Agar Additives 1ml*5
mEC肉汤 mE.Coli Broth 250g
mTSB肉汤 mTSB Broth With Novobiocin 250g
一站式全血 mRNAout25 次费用卵黄琼脂培养基基础 用于肉毒梭菌、产气荚膜梭菌的分离培养（GB标准）用途:用于肉毒梭菌、产气荚膜梭菌的分离培养。成分(g/L)蛋白胨 15.0牛肉粉 3.0氯化钠 5.0琼脂 15.0葡萄糖 10.0pH值7.5 ± 0.1 25℃用法称取本品 48.0g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟 ,冷至 50℃左右时,加入 50% 卵黄乳液100ml,摇匀,倾入无菌平皿。
含铁牛奶培养基 用于产气荚膜梭菌的牛奶发酵试验用途:用于产气荚膜梭菌的牛奶发酵试验。成分(g/L)全脂奶粉 100.0亚铁 1.0用法称取本品 101.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装试管,116 ℃高压灭菌 10 分钟,备用。
梭菌鉴别琼脂（DCA） 用于干燥食品盐还原梭菌的计数和培养用途:用于干燥食品中盐还原梭菌的计数。用法称取本品 43.25g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
强化梭菌鉴别琼脂（DRCA） 用于食品和其它物质中梭菌的计数和培养（MERCK方法）用于食品和其它物质中梭菌的计数和培养（MERCK方法）产品用法： 称取本品 42.75g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装试管,121℃高压灭菌 15 分钟备用。
操作步骤:
1. 一站式全血 mRNAout25 次费用匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
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文献和实验2.3 中准备好的 Fab-Strep，让其自动往下流（孵育时间是足够 2 分钟的）； 1.9 加入2 ml Buffer CI洗柱子。更换下面接废液的离心管，至此柱子就准备好了； 1.10 将前面稀释好的血液加入柱子中，一次最多加入 5 ml（为了提高得率，可通过使用 restrictor 来降低流速），并收集血液。每根柱子能承受的全血量请参考对应的说明书 1.11 过完全血后，用 4×10 ml 的 Buffer CI 洗 4 次柱子； 1.12 更换下面接液流的离心管，收集目的细胞。加入
到 Quadrow 上（下图 B）。b) 以 8 ml Buffer CI 清洗并平衡重力柱。c) 加入 1 ml 制备好的 Fab-Strep，在 Fab-Strep 完全进入填料后，孵育 2 mind) 以 2 ml Buffer CI 清洗重力柱即完成。(3) 细胞分选a) 上样 : 将稀释后的全血分梯次加入，每次最多 10 ml。收集流过的样本，里面包含未被标记的细胞。b) 清洗 : 以 10 ml Buffer CI 洗涤重力柱 4 次，收集流出的溶液，是为阴性组分。清洗后填料应转为白色。c) 洗脱
0.9mm针头) 注射器抽打裂解物 5-10 次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30秒)，可以剪切DNA，降低粘稠度和提高产量。6. 较精确估计裂解物体积，加入等体积的70%乙醇（请先检查是否已加入无水乙醇!），此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。7. 立刻将混合物(每次小于700μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA中，（吸附柱放入收集管中）13,000 rpm离心60秒，弃掉废液。8. 加700μl 去蛋白液RW1，室温放置30秒，12，000rpm 离心30秒，弃
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