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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
47
- 英文名：
一站式真菌 mRNAout
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
25 次
服务流程：
1）一站式真菌 mRNAout25 次费用客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
储存事项:
A. 一站式真菌 mRNAout25 次费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 一站式真菌 mRNAout25 次费用组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
PCR 抑制物清除剂1mL 天净沙 Ribo-SPIA cDNA 扩增试剂盒20 次
PCR 污染清除剂500mL 陶瓷研钵 ( 直径 75 mm)1个
硅胶膜离心吸附柱系列 ( 小提 )50 套 陶瓷研钵 ( 直径 60 mm)1个
硅胶膜离心吸附柱 ( 小提 ) 收集管50 只 糖蛋白染色试剂盒10 次
硅胶膜 DNA 离心吸附柱 ( 大提 )1套 糖蛋白蛋白纯化试剂盒50 次
一站式 DNA 非变性 PAGE 电泳套装30 次 水饱和醇10mL
超快核酸电泳液干粉 20L 水饱和酚100mL
超快核酸电泳液干粉 50L 双脱氧 dNTP 套装40uL×4
TAE 电泳液 ,50×250mL 双酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次
TAE 电泳液 ,50×2500mL 石蜡油，PCR 级10mL
羧基磁珠2mL 溶液 ,50mg/mL1mL
环氧基磁珠2mL 髓核细胞生长因子5mL
醛基磁珠2mL 随机引物法 DNA 探针生物素标记试剂盒5次
巯基磁珠 2mL 随机引物法 DNA 探针标记试剂盒5次
壳聚糖磁珠2mL 酸洗玻璃珠系列10g
M-Endo肉汤 英文名称； M-Endo Broth 规格； 250g
CCFA琼脂基础 英文名称； CCFA Agar Base 规格； 250g
双料乳糖胆盐发酵培养基 英文名称； Double Lactose Bile Medium 规格； 250g
肠道菌增菌肉汤 英文名称； Mossel-Enterobacteriaceae Enrichment Broth 规格； 250g
MSA培养基 英文名称； MSA Medium 规格； 250g
乳糖蛋白胨培养液（含小倒管） Lactose Peptone Broth 10ml*20支/包
双料乳糖蛋白胨培养液（含小倒管） Double Lactose Peptone Broth 10ml*20支/包
RV肉汤 RV Broth 10ml*20支/包
GN增菌液 GN Enrichment Broth 9ml*20支/包
SBG增菌液 SBG Enrichment Broth 10ml*20支/包
一站式真菌 mRNAout25 次费用矿物盐琼脂 用于家用纺织品防霉性能测试用途:用于家用纺织品防霉性能测试。成分(g/L)铵 3.0磷酸二氢钾 2.5磷酸氢二钾 2.0七水镁 0.2七水亚铁 0.1琼脂 20.0pH值6.0- 6.5 25℃用法称取本品 23.7g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15 分钟,冷至 50-55℃时,倾入无菌平皿,备用。
酵母蛋白胨培养基 用于真菌的培养用途:用于真菌的培养。成分(g/L)酵母浸粉 1.0多价蛋白胨 2.0牛肉浸粉 1.0葡萄糖 10.0琼脂 20.0pH值7.0±0.1 25℃用法称取本品 34g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
麦芽汁琼脂 用于霉菌和酵母菌计数用途:用于霉菌和酵母菌计数。成分(g/L)麦芽浸粉 130.0氯霉素 0.1琼脂 15.0pH值6.0 ± 0.2 25℃用法称取本品 145.1g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
YM培养基 用于霉菌和酵母菌的增菌培养用途:用于霉菌和酵母菌的增菌培养。用法称取本品 21.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
实验步骤：
(1) 一站式真菌 mRNAout25 次费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验真菌病害是作物产量损失的主要原因之一，作物病害的80%由病原真菌所引起。迄今，对作物真菌病害的控制，一是选育并采用抗性品种，二是使用化学杀菌剂，三是采取预防措施，如轮作、避免受侵染土壤和带病原植物材料的传播等。然而，化学杀菌剂成本较高，且最终导致病原菌的抗药性，其残毒还引起环境污染等问题。综合采用有性杂交及现代生物技术选育并推广抗病品种，这是所有病害防治策略中最经济有效的方法。特别是重组DNA技术的创立和发展，已可将动物、植物、微生物的基因相互转移，突破了物种之间难以杂交的天然屏障，开辟了植物
标本采集和运送是细菌和真菌培养成功的最最重要的关键！但由于标本的采集和运送常有护士或医生或病人自己完成,所以也是最不容易做好的事情，而且不知道问题所在之处，由此引发的最主要后果是阳性率下降，这也是临床医生最不能接受的问题. 因此,临床微生物检验标本采集应规范化, 有助于临床合理使用抗菌药物. 表1血和脊髓 标本类型
由于真菌菌丝体中多糖含量较高，很多方法不易去除干净，不能用于做基因组酶切。使用如下方法提取菌丝DNA产量高，多糖和蛋白质含量低，符合分子生物学研究要求。1、取1 g 菌丝体放入冰箱中冻结，然后置于研磨钵中研磨成浆，转入1.5 ml的离心管中；2、加入0.7 ml提取缓液（0.01 mol.L-1 Tris.HCl，pH 8.0；2% CTAB，w/v； 0.02 mol.L-1 EDTA；1.4 mol.L-1 NaCl；2%巯基乙醇，v/v）；3、50℃水浴30 min；4、加入0.7 ml
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