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免疫组化IHC
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广州伯信生物科技有限公司
免疫组织化学(Immunohistochemistry)又称免疫细胞化学,是根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原和一抗结合,再利用一抗与标记生物素的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素)结合,最后通过呈色反应在光学显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应物,从而原位确定特定蛋白质的分布和含量。
客户提供
① 组织:新鲜或固定(10%中性甲醛、4%多聚甲醛)组织样本;
② 细胞:新鲜(大于106)或固定(10%中性甲醛、4%多聚甲醛)细胞样本;
③ 切片:石蜡切片,冰冻切片以及细胞爬片,涂片;
④ 实验材料:一抗;
伯信提供
① 染色后的切片;
② 实验报告(实验仪器、试剂、方法、结果、结论);
结果实例
① 组织:新鲜或固定(10%中性甲醛、4%多聚甲醛)组织样本;
② 细胞:新鲜(大于106)或固定(10%中性甲醛、4%多聚甲醛)细胞样本;
③ 切片:石蜡切片,冰冻切片以及细胞爬片,涂片;
④ 实验材料:一抗;
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① 染色后的切片;
② 实验报告(实验仪器、试剂、方法、结果、结论);
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文献和实验相关实验
免疫组化(IHC)实验流程。
免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的一项技术。 IHC 的实验流程和方法总体不难,但做出漂亮的染色结果却不容易,所谓“细节决定成败”,也正是IHC 实验中尤为重要的关键点。那么“细节”主要是哪一些呢?下面就为您一一道来。(以石蜡组织切片为例介绍) 标本固定 固定的目的除了使细胞内的蛋白质凝固,减少
所有用于免疫组化/免疫细胞化学实验的样本都必须进行固定,以保持组织形态并保留靶分子的抗原性。固定会改变组织的化学成分,通常需要在保持组织结构和保留抗原表位之间做出权衡。细胞或组织固定不完全(固定不足)可能导致组织内靶蛋白快速蛋白水解降解,从而降低特异性免疫反应性。然而,过度固定(固定过量)可能导致抗原表位被掩盖或产生强烈的非特异性背景染色,从而掩盖特异性标记。固定方法和时间的选择必须结合样本制备进行考虑。此外,固定时间、温度和pH值都会影响固定程度。 甲醛 甲醛是用于保存组织和细胞内蛋白质靶
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免疫组化(IHC)
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