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DNA荧光原位杂交(DNA-FISH)
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广州伯信生物科技有限公司
DNA-FISH原理:将直接与荧光素结合的寡聚核苷酸探针或采用间接法用生物素、DIG等标记的寡聚核苷酸探针与变性后的染色体、细胞或组织中的核酸按照碱基互补配对原则进行杂交,经变性—退火—复性—洗涤后即可形成靶DNA 与核酸探针的杂交体,直接检测或通过免疫荧光系统检测,最后在荧光显微镜下显影,即可对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。
① 组织:新鲜或固定好的组织样本;
② 细胞:新鲜(大于106)或固定好的细胞样本;
③ 切片:石蜡切片,冰冻切片以及细胞爬片,涂片;
④ 实验信息:基因名称及ID;
伯信提供
① 染色后的切片;
② 探针序列;
③ 电子图片(普通荧光显微镜或激光共聚焦显微镜);
④ 实验报告(实验仪器、试剂、方法、结果、结论)。
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文献和实验Application of FISH to Detect DNA Damage: DNA Breakage Detection-FISH (DBD-FISH)
Chromatin structure can affect the level of induced DNA damage and/or repair, and so these effects may vary within different DNA sequence areas of a cell, as well as between different cell types. DBD-FISH is a procedure that allows
信号。FISH具有快速灵敏、特异性好的特点,可同时分析分裂期和间期的多个细胞,并进行定量;可以检测隐匿或微小的染色体畸变以及复杂核型;还可以使用多种荧光标记,显示DNA片段及基因之间的相对位置与方向,空间定位精确。 2. 荧光原位杂交探针的类型 FISH技术种类甚多,发展迅速,其实现需要获得能与靶序列互补结合的探针。常用的探针有以下三类: (1)染色体重复序列探针,主要是指着丝粒α-卫星 DNA重复序列探针和端粒重复序列探针
荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)
实验原理荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。FISH的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸
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