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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海谷研
- 库存:
55
- 英文名:
Rat Lung PrimacellTM:NormalArtery Smooth Muscle Cells
- 生长状态:
贴壁;悬浮
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
1.2ML/1.5ML
1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement
2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO
3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S
4、染色液: 0.4% Trypan Blue
5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit
6、检测试剂:鼠抗人及大鼠desmin一抗,肌球蛋白(myosin)单克隆抗体
大鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒规格【Rat Lung PrimacellTM:NormalArtery Smooth Muscle Cells】
大鼠肺大动脉平滑肌细胞分离自正常大鼠肺动脉组织,细胞呈梭形或多角形。该细胞所表达的钙通道表面表达的ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁炎症反应。该细胞也是多数重要动脉疾病的靶细胞。 虽然肺大动脉组织机械韧性很强,但利用本公司试剂盒中提供的肺大动脉组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的薄的肺大动脉组织片能使得肺大动脉组织中成肺大动脉细胞的一些功能特性发生改变,从而将成肺大动脉细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养肺大动脉细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以最大程度地降低所培养的成肺大动脉原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒适合于培养肺大动脉组织细胞。本试剂盒包含: (1)OptiTDSTM大鼠肺大动脉平滑肌细胞组织解离液(3×1ml) (2)大鼠肺大动脉平滑肌细胞组织处理缓冲液(100ml) (3)FibrOutTM大鼠肺大动脉平滑ᰀ
服务特点:
1. 大鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒规格细胞纯度高:原代分离得到的目的细胞最高纯度可达到95%以上;
2. 细胞活力强:原代分离的细胞一般不能长久传代,提供P0-P3代的细胞,活力达80%以上,无污染;
3. 多种鉴定方式:可根据需求提供流式细胞检测、免疫细胞化学、Realtime PCR及蛋白印迹等多种检测方法。
原代细胞分离:
一、大鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒规格细胞培养
1取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。2培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏(可参阅后面有关章节)为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度-196℃,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲亚砜或甘油)的培养基,以一定的冷却速度冻存,最终保存于液氮中。在极低的温度下,细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法,即从液氮中取出冻存管后,立即放入37℃水中,使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。
二、原代细胞分离
凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,最简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。2实体组织材料的分离方法对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。
三、细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法,通过直接测定进行分裂
的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法,即细胞活力(cell viability)检测方法,通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然,细胞活力检测法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序,但药物的干扰可抑制凋亡的发生;这时若采用细胞活力检测法,显然可以区分两种条件下的细胞数量,但我们并不能从药物干扰组细胞数大于对照组的事实说明药物可促进细胞增殖的结论。所以最直接的证据应该采用方法一。
其中常见检测:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成。
四、细胞周期检测技术
细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程,所需的时间叫细胞周期时间。
常用的方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法。
五、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL。
六、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验
实验操作:
1、 大鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒规格新生小鼠拉颈椎处死,乙醇消毒腿部,在超净工作台内,取肌肉于平皿,Hank’s洗3次,剔除脂肪、结缔组织,将肌肉标本剪约0.1cm3小块;
2、 将剪碎的肌肉移至离心管,Hank’s洗3次,静置1min,弃去上层液及漂浮组织
3、 向上述离心管中加入0.25%胰酶,37度水浴消化20min,每5min摇动或吹打1次离心管,然后加入生长培养基终止消化;
4、 反复吹打后,依次100,200,400目过筛,滤液收集后,1000r/min离心10min;
5、 弃去清夜,用生长培养基重悬细胞,悬液加入未经PPL包被的培养瓶中,差速贴壁去除成纤维细胞,37度培养1h后,转移包被瓶中,生长培养基培养,4d换液,以后每天换液1次。
酒石酸长春瑞滨(标准品)Vinorelbine125317-39-7
酒石酸长春瑞滨水合盐Vinorelbinesalt
酒石酸长春质碱Catharanthine4168-17-6
桔梗皂苷D(标准品)Platycodin58479-68-8
桔红素;桔皮素(标准品)Tangeretin质量规格:HPLC≥98%,标准品
桔红素;桔皮素Tangeretin质量规格:HPLC≥98%,BR
菊粉;菊糖Inulinchicory
菊苣酸(标准品)Cichoric6537-80-0
巨大戟醇(标准品)Ingenol质量规格:HPLC≥98%,标准品
具栖冬青苷(标准品)Pedunculoside质量规格:HPLC≥98%,标准品
聚丙二醇Polypropylene2000
聚肌苷酸Polyinosinic30918-54-8
聚维酮碘Poly(vinylpyrrolidone)–Iodine25655-41-8
聚酰胺粉(柱层析用)Polyamide质量规格:柱层析用
聚酰胺粉(柱层析用,10-30目)Polyamide质量规格:柱层析用,10-30目
大鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒规格膜联蛋白A5检测试剂盒 规格: 48T/96T
膜联蛋白A5检测试剂盒 规格: 48T/96T
膜联蛋白A5检测试剂盒 规格: 48T/96T
膜联蛋白A5检测试剂盒 规格: 48T/96T
膜联蛋白A5检测试剂盒 规格: 48T/96T
膜联蛋白A6检测试剂盒 规格: 48T/96T
膜联蛋白A7检测试剂盒 规格: 48T/96T
膜联蛋白A8检测试剂盒 规格: 48T/96T
膜联蛋白A9检测试剂盒 规格: 48T/96T
鲑鱼降钙素检测试剂盒 规格: 48T/96T
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文献和实验? (1)对于罕见组织(如临床活检样本、胚胎组织、罕见病变组织等),这类稀有,微量,难获得的组织解离,在解离方案没有优化出来的情况下,建议选择类似的模式生物样本进行解离方案的优化,而不是直接用珍贵的罕见组织进行试验。 (2)可以选择通用型组织解离试剂盒,通过机械分离与酶消化相结合的方式,将组织分解成单细胞悬液,这种处理方式能够保持组织的结构完整性。其操作温和、快速且效果显著,能够解离后保持细胞活性。 (3)针对小鼠前列腺,小鼠耳部,发炎神经组织,大鼠肺部,成年小鼠/大鼠心脏等组织,结合通用的组织解离试剂盒,使用
表面血丝和粘膜; 2. 将清洗过的大动脉剪成2.5 ~ 3cm的血管段,剥离外膜; 3. 将去外膜的血管段放入培养皿中,纵向剪开管壁,然后使内膜朝上,用小刀片轻轻刮去内膜细胞。加1×PBS洗涤中膜3次,将中膜剪成1mm3的组织块; 4. 将组织块移入50ml离心管中,加入适量0.1%胶原酶Ⅰ溶液,在37℃恒温箱中消化1 ~ 3h,至组织块成絮状为止; 5. 1000r/min,离心5min,去上清。再加入0.125%胰蛋白酶溶液,37℃水浴中搅拌消化5 ~ 10min。用含血清的培养
我养了快半年的大鼠气道平滑肌细胞,有一点体会,特发上来和各位战友交流一下,互相进步。 壹. 器械 显微器械:眼科剪一把,直弯眼科镊各一把,细结镊一把,手术刀一把,针头诺干 杀老鼠器械:手术剪一把,大镊子一把,弯眼科镊一把,组织钳一把,50ml烧杯一个(锡纸包好) 另外:10ml离心管两个,培养皿两个,10ml的瓶子三个,小滤器两个,硅胶板一块,培养瓶盖子诺干 贰。试剂 D-HANKS液250ml,双抗2ml(青霉素16万U/ml链霉素15万U/ml),一型胶原
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