双染检测试剂盒（抗小鼠IgG/HRP+抗兔IgG/AP）

双染检测试剂盒（抗小鼠IgG/HRP+抗兔IgG/AP）
产品名称： 双染检测试剂（抗小鼠IgG/HRP+抗兔IgG/AP
编号：DS-0003
详细信息：
分类： 检测系统
子分类： DS双染试剂盒
规格： 60测试/盒,120测试/盒
主要成分： 试剂1 内源性过氧化物酶阻断剂
试剂2 即用型组合二抗（HRP标记抗小鼠IgG+AP标记抗兔IgG）
试剂3 显色剂3A 显色剂3B
试剂4 显色剂4A 显色剂4B
检验方法： 1) 脱蜡和水化石蜡切片置于新鲜二甲苯中，2缸，浸泡10分钟/缸；去除多余的液体后，置于无水乙醇中，2缸，浸泡2分钟/缸；去除多余的液体后，置于95%乙醇中，1缸，浸泡2分钟；去除多余的液体后，置于75%乙醇中，1缸，浸泡2分钟；去除多余的液体后，蒸馏水冲洗，置于Ultra冲洗缓冲液中。
2) 抗原修复 高压锅中，加入EDTA抗原修复液，高火预热；待修复液沸腾后将切片置于其中，并完全浸泡组织，盖好锅盖，扣上压力阀，高火继续加热；待限压阀开始转动喷气后调至中火，同时开始计时2.5分钟；计时结束后离开热源，放气降压后将高压锅移入冷水中冷却；待锅中液体冷却至室温后取出切片，Ultra冲洗缓冲液浸泡清洗2分钟×3次。
3) 滴加试剂1 加入50μL的试剂1（内源性过氧化物酶阻断剂），室温孵育10分钟；蒸馏水洗2次后甩干液体，用免疫组化笔在距离组织周围2-3mm处画圈；Ultra冲洗缓冲液浸泡2分钟×3次。
4) 根据检测需要滴加50μL 组合一抗或空白对照试剂，37℃孵育60分钟或2～8℃孵育过夜；Ultra冲洗缓冲液浸泡2分钟×3次。
5) 滴加试剂2 滴加50μL 试剂2，37℃孵育30分钟；Ultra冲洗缓冲液浸泡2分钟×3次。
6) 滴加试剂3 滴加50μL试剂3，室温孵育10-15min；Ultra冲洗缓冲液浸泡2分钟×3次。
7) 滴加试剂4 滴加50μL试剂4，室温孵育5-10min；自来水冲洗。
8) 复染 苏木素染色液室温染色30～60秒，自来水冲洗干净，晾干。注意：需要控制苏木素染色液的染色强度。颜色过浅或过深都会干扰显色结果的观察。
9) 水洗后返蓝
10) 快速脱水、透明、中性树胶封片。
11) 结果判读 在光学显微镜下对染色后切片进行观察和结果判读。