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- 供应商:
上海觅拓生物
- 规格:
5X10^7TU
| 货号: | EXOTRA-631 |
外泌体特指直径在30-150nm的盘状囊泡,其主要来源于细胞内多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9)、热休克蛋白家族(HSP60, HSP70和HSP90),本示踪病毒使用CD63作为生物标记,通过将CD63与荧光蛋白偶联,带荧光的膜蛋白会在表达至外泌体膜上,便于后续进行、观察内化或其他实验。
| CD63-tdTomato标记示踪exosome感染HUVEC细胞 |
| Exosome 示踪慢病毒 | 货号 | 总量 |
| ExoPerfect exo-CD63-GFP 慢病毒 | EXOTRA-631 | 5X10^7TU |
| ExoPerfect exo-CD63-RFP 慢病毒 | EXOTRA-632 | 5X10^7TU |
二、使用方法:
1. 准备细胞
将状态良好的目的细胞接种到24孔板中,细胞计数后,进行铺板,每孔加入适量培养基。
2. 病毒感染,换液
根据细胞MOI值来计算并加入适量示踪病毒。添加感染增强剂polybrene,保证终浓度为5ug/ml,感染8~12小时后,观察细胞状态,并更换无外泌体血清的培养基继续培养24-72小时后,提供细胞上清也进行外泌体抽提,此外泌体即带有荧光标记,可供后续外泌体感染目的细胞,并通过激光共聚焦查看目的细胞荧光进行示踪。
三、保存条件:
可-80°C 长期保存,不可反复冻融。
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- 内容
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文献和实验的 BLI 信号显著高于 GL261-Fluc 组。 Akaluc BLI 系统可以追踪更少数量的移植胶质瘤细胞,从而有助于更准确地模拟肿瘤发生和早期肿瘤生长。 Akaluc BLI 系统可用于在体内对胶质瘤治疗反应进行纵向追踪。 总之,Akaluc BLI 提供了一种敏感的方法用于体内追踪胶质瘤生长、侵袭和转移,特别适用于对较小的肿瘤进行成像以及监测治疗后的肿瘤复发。 图 4 用于递送 Akaluc BLI 系统的慢病毒载体结构示意图以及 Akaluc BLI 系统体内示踪效果。 参考
光)、DiO(绿色荧光)、DiD(红色荧光)、DiR(深红色荧光)。其中DiR的红外荧光可穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。 图3 DiI 标记的外泌体通过静脉注射观察在体内器官的分布情况 J Cereb Blood Flow Metab. 2018 May;38(5):767-779. 图4 DiO 标记的外泌体与 HCT116 细胞共孵育 BMC Cancer. 2018 Jan 6;18(1):47. 图5 DiR 标记的外泌体静脉注射小鼠结肠癌肿瘤模型 J
、分子排阻色谱、不对称流场分离技术等。为了改进分离效率和特异性,新的方法也层出不穷,包括:微流体过滤、无接触分选、免疫亲和富集等。基于物理特性鉴定外泌体的方法有:显微镜技术包括扫描电镜技术(SEM)、透射电镜技术(TEM)、冷冻电镜 (cryo-EM)、原子力显微镜(AFM);动态光散射 (DLS);纳米颗粒示踪分析 (NTA);可调电阻脉冲传感 (TRPS);以及单一 EV 分析法 (SEA)外泌体显微成像. a) SEM;b) TEM; c) cryo-EM; d) AFM from Shao
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