产品封面图

染料法支原体污染实时定量PCR试剂盒

收藏
  • ￥1080 - 3580
  • Biothrive
  • Myco-qs-20/Myco-qs-50/Myco-qs-100
  • 上海
  • 2025年10月26日
    avatar
    上海觅拓生物科技有限公司
    10 年金牌会员

  • 企业认证

    点击 QQ 联系

    • 相关产品推荐更多 >

    万千商家帮你免费找货

    0 人在求购买到急需产品
    • 详细信息
    • 询价记录
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 库存：

      10

    • 英文名：

      Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma contamination

    • 供应商：

      上海觅拓生物科技有限公司

    • 保存条件：

      -20度

    • 规格：

      20T/50T/100T

    规格：20T产品价格：￥1080.0
    规格：50T产品价格：￥2080.0
    规格：100T产品价格：￥3580.0
    产品细节图片1
    染料法    支原体污染实时定量PCR试剂盒
    Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma contamination

     
    货号 规格
    Myco-qs-20 20次反应
    Myco-qs-50 50次反应
    Myco-qs-100 100次反应


    储存：-20度，避光保存，有效期一年。避免反复冻融。

     
    试剂盒特点：
    1， 本试剂盒对柔膜菌纲（包括支原体、螺原体和无胆甾原体）有极强的特异性，与柔膜菌纲以外的其他基因组无交叉反应。
    2， 本试剂盒灵敏度高，最低可检出反应液中2-4个基因组。
    3， 本试剂盒使用热启动的Taq酶，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。
    4， 本试剂盒带有阳性对照样品（组分C），可用于检验试剂盒有效性，也可用于验证待测样品中是否含有PCR抑制剂。
    5， 本试剂盒带有ROX参比染料，帮助校正加样误差和管间差异。
     

     
    商品说明
    支原体(Mycoplasma)属于柔膜菌（Mollicutes）纲,直径约0.1-0.3 μm,具有变形能力，因此可以轻易穿过常规的0.22 μm无菌滤膜,是常见的动物细胞培养污染源。由于支原体体积太小，在光学显微镜下不可分辨，因此细胞常常在不知不觉中被污染。
    目前的经典检测方法是欧洲药典（European Pharmacopeia）2.6.7规定的体外培养法，用特殊培养基对支原体进行培养，以此检测污染情况。培养法的优点是检测灵敏度高，缺点是耗时较长，最长的需要28天之久，而且受操作人员的技能水平影响较大，不同实验室的检测误差较大。随着生物制药业的发展，很多生物制品保质期较短，因此需要一种快速、灵敏并且特异性强的支原体检测方法。欧洲药典因此接纳了核酸检测方法作为培养法的替代方案。定量PCR法可以在几个小时内完成检测，灵敏度与培养法相当，甚至更好。
    本试剂盒以16S rRNA基因为靶点，设计了多对引物，可检出大部分已知的支原体，以及部分螺原体和无胆甾原体，与亲缘关系较近的革兰氏阳性菌，如链球菌、梭菌、乳杆菌等，没有交叉反应，在检测范围和特异性方面达到欧洲药典的要求。欧洲药典提及的所有支原体均在本试剂盒的检测范围内。灵敏度方面，最低检测值可以达到每个反应2-4个基因组，在不考虑DNA提取损耗的情况下，达到欧洲药典要求的10 CFU/mL的最低检测值。
    本试剂盒包含热启动Taq酶、dNTP（以UTP代替了TTP）、引物、阳性对照品、SYBR Green I染料、ROX染料，和用以防止残余DNA污染的UDG（尿嘧啶-N-糖苷酶），用户只需准备好DNA样品即可使用。


    注意事项：
    1，     本产品仅限于科研使用，不作诊断用途。
    2，     操作过程中应注意防范样品之间的串联污染。最好对工作区域进行划分，将不同步骤，如DNA提取和PCR反应液的配制，分开在不同阶段不同区域进行。使用无污染的一次性枪头，最好是带滤芯的枪头。最好在通风区域操作，操作时须佩戴无粉尘手套。
    3，     对于在584 nm附近可产生激发光的仪器（大部分使用钨灯或卤素灯作为光源的仪器，还有一些仪器专门配置了LED灯，可激发~584 nm光源），ROX的反应浓度为30-50 nM。对于不能在584 nm附近可产生激发光的仪器（大部分以激光为光源的仪器），ROX的反应浓度为300-500 nM。具体可参考仪器的使用手册，下表仅供参考。

     
    Type qPCR system
    50×ROX Reference Dye（300-500 nM） Applied   Biosystems 7000/7700/7900HT/7300/7900HT Fast;
    ABI Step One；ABI Step One Plus
    500×ROX Reference Dye（30-50 nM） Applied   Biosystems 7500/7500 Fast；Stratagene Mx3000P/Mx3005P/Mx4000;
    MJ Research Chromo4；Opticon (II)；Corbett Rotor Gene 3000
    no ROX   Reference Dye Thermal   Cycler Dice，Bio-Rad iQ5/CFX96/CFX384/Opticon,
    Roche Lightcycler，Qiagen Rotor-Gene，
    Eppendorf Mastercycler，Cepheid SmartCycler
      

    相关小知识：
    热启动Taq酶结合了特异性单克隆抗体的DNA聚合酶，在室温下聚合酶活性被抗体抑制。在PCR循环的变性阶段，抗体受热被去除，聚合酶活性恢复，因此获得“热启动”功能，可减少残余DNA的污染，提高PCR扩增效率、灵敏度和目的片段产量。

    SYBR Green I可以与DNA双链的小沟结合，结合后在497nm激发光照射下产生520nm的发射光。未结合双链DNA的SYBR Green I基本不产生荧光。因此可以根据荧光值的大小判断溶液内DNA双链的多寡，用于实时检测PCR反应过程中产物的累积量。初始模板浓度越高，反应循环数越高，则双链DNA含量越高，荧光值也就越高。值得注意的是，SYBR Green I也可以结合非特异性PCR产物以及引物二聚体，此时产生的荧光与目标扩增产物无法区分。为了判断荧光信号是否来自目标扩增产物，可以绘制熔解曲线。通过逐步缓慢升温，使双链DNA解离为单链DNA，同时检测荧光值的变化，绘制曲线，根据荧光值观察DNA解链的温度。
    UDG和dUTP可以阻止前次步骤残余DNA的扩增。dUTP可以确保扩增后的DNA中均含有尿嘧啶。UDG可从单链或双链DNA上去除尿嘧啶残基，从而阻止含有尿嘧啶的DNA作为下几轮PCR的模板。在PCR循环开始前的UDG孵育步骤，可以破坏带有尿嘧啶的PCR产物。经过该去除污染步骤后，UDG在正常的PCR循环过程中被高温灭活，对PCR反应没有影响。
    ROX不参与PCR反应，在PCR反应过程中荧光没有变化，可以提供一条基线用于校正加样误差和管间差异，便于仪器自动分析报告荧光与内参ROX荧光的比值，使定量更准确。ROX染料的激发波长为584nm，发射波长为612nm。用ROX进行校正后可以使实验误差减小十倍左右。

    风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。

    • 作者
    • 内容
    • 询问日期
    图标文献和实验
    相关实验

    • 你养的细胞，可能又被支原体污染了？

      为阴性的细胞） 使用该试剂盒还有一些 ↓ 注意事项   1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书全文。 2 为保证结果可靠性，建议每次实验都有阳性和阴性对照，每个反应各加4μl，阳性对照随试剂盒提供，阴性对照为灭菌ddH2O，需客户自己准备。 3 操作时应尽量少说话，或带口罩，因口腔中也含有支原体，可能引起样品污染，而造成假阳性。 4 细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响检测结果，如果用户需要进一步提高检测灵敏度，建议用不含双抗

    • 支原体污染

      容器内，辐射后以干粉原型贮藏，不但培养基的纯净性得到保障，而且营养性能较过滤后以水溶液形式保存更稳定，对谷氨酰胺等这类水溶液不稳定者特别合适。 目前，有专门做支原体检测的试剂盒，可以用细胞滴片检测。市场上已有了新一代支原体抗生素M-Plasmocin（InvivoGen公司），能有效的杀灭支原体，又不影响细胞本身的代谢，而且处理过的细胞不会重新感染支原体。另外，配合支原体检测试剂盒（市场上有售，如美国ICN公司的产品），可以帮助尽快发现支原体的污染。                     

    • 哈？细胞又污染了？这里有一份祖传的鉴污宝典

      ，而且白色念珠菌会互相通过孢子传染。杆菌污染特征：镜下看到许多杆状的细菌，培液颜色没有明显改变。支原体污染特征：支原体污染很隐蔽，主要表现为细胞在生长速度变慢，细胞状态形态改变，而且不断死亡，镜下没啥改变，有时可见许多黑色的细胞碎片。检测支原体污染可以使用支原体检测试剂盒进行检测，现在市面上抗支原体的药很多，效果也都可以。不确定是不是支原体污染可以使用支原体药试一下，如果细胞状态明显改善，有可能就是支原体污染。黑胶虫污染特征：很邪乎，各种说法都有，一般认为是镜下许多黑点在不断布朗运动，刚开始对细胞没

    查看更多相关实验 >
    图标技术资料

    需要更多技术资料 索取更多技术资料

    资料下载：

    Myco-qs-20 SYBR法支原体污染说明书20210115.pdf 附 (下载 2 次)

    同类产品报价

    产品名称
    产品价格
    公司名称
    报价日期
    支原体去除喷剂
    ¥280
    上海信裕生物科技有限公司
    2025年07月13日询价
    支原体去除喷剂
    ¥280
    上海再康生物科技有限公司
    2025年11月20日询价
    支原体去除喷剂
    ¥280
    上海沪震实业有限公司
    2025年07月11日询价
    支原体染色检测试剂盒
    ￥252
    上海博尔森生物科技有限公司
    2025年07月10日询价
    支原体染色检测试剂盒
    询价
    上海西格生物科技有限公司
    2025年07月09日询价
    染料法支原体污染实时定量PCR试剂盒
    ￥1080 - 3580