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STEMCELL新推出的ImmunoCult™小鼠T细胞激活剂由可溶性的抗体复合物组成,其可靶向CD3和CD28细胞表面配体(还可选择靶向CD2),为T细胞激活和培养提供所需的主要和共刺激信号,从而在无需磁珠、饲养层细胞或抗原的情况下实现小鼠T细胞的高效激活和扩增。
本试剂盒包含3个试剂盒组分(A、B和C),仅需2 - 3天即可实现T细胞激活。组分A包含抗小鼠CD3和CD28抗体,可提供必需的抗原和共刺激激活信号。组分B包含抗小鼠CD2抗体,可选择性地靶向CD2。组分C有助于交联组分A和B中的抗体。所有试剂都高度稳定、无菌且可溶,且无需T细胞培养过程中耗时的包板步骤,可无缝衔接至当前已建立的工作流程中。
此外,ImmunoCult™小鼠T细胞激活剂可与EasySep™细胞分选试剂盒结合使用,其与EasySep™小鼠T细胞分选试剂盒(产品号 #19851)、EasySep™小鼠CD4+ T细胞分选试剂盒(产品号 #19852)、EasySep™小鼠CD8+ T细胞分选试剂盒(产品号 #19853)、EasySep™小鼠Naïve CD4+ T细胞分选试剂盒(产品号 #19765)、EasySep™ Release小鼠CD4+CD304+调节性T细胞分选试剂盒(产品号 #100-1570)以及EasySep™小鼠CD4正选试剂盒II(产品号 #18952)等试剂盒兼容。
灵活:只需使用单一的试剂盒即可靶向CD3/CD28或CD3/CD28/CD2高效地激活小鼠T细胞。
高效:无需使用磁珠、饲养层细胞或抗原即可实现T细胞的最佳激活。
温和:使用温和的激活剂以维持具有高活性的功能性T细胞。
兼容:高度稳定、无菌、可溶性,与常见的T细胞培养基以及EasySep™ T细胞分选试剂盒兼容。
图1 使用ImmunoCult™小鼠T细胞激活剂可获得高扩增倍数的可靠且具功能性的T细胞
使用EasySep™小鼠T细胞分选试剂盒分离小鼠T细胞后,用ImmunoCult™小鼠T细胞激活剂进行激活,并在IMDM + FBS中培养7天。(A) 培养3天后,用ImmunoCult™小鼠CD3/CD28 T细胞激活剂或ImmunoCult™小鼠CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂激活,CD25+细胞的含量分别为91.9 ± 5.1% (n = 11) 或 99.9 ± 0.1% (n = 5)。激活后的小鼠T细胞在整个培养期间均表达CD25。(B) 每2 - 3天评估活细胞数量,并补充含IL-2的新鲜培养基。在7天的培养期间未添加额外的ImmunoCult™小鼠T细胞激活剂。使用ImmunoCult™小鼠CD3/CD28 T细胞激活剂或ImmunoCult™小鼠CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂进行激活分别得到23 ± 3.4或29.3 ± 4.8倍扩增(平均值±标准误差,n = 6)。
图2 使用EasySep™分离的T细胞,用ImmunoCult™小鼠T细胞激活剂激活后表现出较高的细胞增殖率
通过EasySep™分离的小鼠T细胞用CFDA-SE进行标记,使用ImmunoCult™小鼠T细胞激活剂进行激活,并在IMDM + FBS中培养。第3天,收集细胞,用抗小鼠CD4和CD8a抗体染色,然后通过流式细胞术检测。图中显示的是CFDA-SE标记的小鼠T细胞,以活性CD4+ (A) 或CD8a+ (B) 细胞设门,分别分析不使用激活剂、使用ImmunoCult™小鼠CD3/CD28 T细胞激活剂或使用ImmunoCult™小鼠CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂培养后的细胞增殖情况(每次细胞分裂时CFDA-SE信号强度降低50%)。
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