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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
485
- 英文名:
TG1 Chemically Competent Cell
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
- 规格:
10×100μl/50×100μl
特别提示:包括TG1化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:TG1化学感受态细胞
英文名称:TG1 Chemically Competent Cell
产品货号:MQ0014
产品规格:10×100μl/50×100μl
TG1来源于E.coli K-12菌株,是目前生长速度zuì快的克隆用大肠杆菌菌株,在平板上37℃,7h可见克隆。
主要的噬菌体展示用菌株,同时也可用于普通质粒的构建,lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验;但不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。
TG1感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率>1×109cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
[F´traD36 proAB lacIqZΔM15]supE thi-1Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rK–mK–)
操作说明:
1.TG1感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少zuì终用于涂板的菌量。
除了TG1化学感受态细胞,,我公司还供应以下相关产品:
BTN60106 平末端DNA加T试剂盒 50次
YT412 EDTA溶液(0.5M)(pH8.0) 100ml
YT453 p53荧光素酶报告基因质粒(p53抑癌基因质粒) 1μg
YT469 C端Flag标签融合蛋白质粒 1μg
ALH430 DNA转染试剂 0.5ml|1ml
RFT108 2×ligation solution MasterMix 150μl
SY0284 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点) 20T
JN0105 2×pED-T vector快速连接预混液 20次
JN0111 pBalbSumo质粒 20次(1μg)
QN1048 PBR322载体 20ug
QN1060 pET-28a(+)载体 20ug
MQ0052 F-BL21(DE3)化学感受态细胞 10×100μl/50×100μl
MQ0061 LBA4404农杆菌电转感受态细胞 10×50μl/50×50μl
MQ0065 AH109酵母感受态细胞 10×100μl/50×100μl
BTN160684K 零背景平末端克隆试剂盒(Kan抗性) 25次
GL1187 氯化钙细菌感受态制备液 100ml
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文献和实验天,如你说的,按1:100扩大培养;OD达到0.5~0.6开始制备感受态细胞。 制备好的感受态细胞分装到1.5 EP管中,一般为100 μl 每管 感受态效价的测定: 转0.1 ng 标准质粒到100 ul 的感受态细胞中,1.5 KV 电压电击,37度培养1小时,稀释涂布所谓的“稀释倍数”是指这的稀释一般情况下TG1电转感受态的效价(即转化频率)在108~109所以反推预测,我们一般会稀释10-2~10-3梯度来涂布。如果涂布50 ul,假设在10-2板上N个菌落, 套公式:
摘要: coli TG1单菌落,接种于5ml LB液体培养基中,37℃下振荡培养12小时左右,取50ul培养液转入5ml LB中,37℃振荡培养1~1.5小时至对数生长期OD600=0.5左右.2、感受态细胞的制备⑴、将培养液1.5ml转入离心管中,冰上放置20分钟.⑵、置于4℃,5000rpm离心5分钟,倒尽上清. 摘要: coli TG1
或宿主菌 请问pucm-t载体能否用JM109转化? 转化后问题 请教一个关于转化后筛选的问题 求助!鉴定转化产物 感受态细胞 请教各位化学转化的感受态细胞 [/如何制作转化效率高的BJ5183化学感受态 HANAHAN法制备高频转化的感受态细胞是不是非常脆弱啊? 讨论细菌转化时热休克的作用(结果update) 转化过程中的外源DNA吸收机制 转化效率 怎样计算转化效率? 求教转化效率如何计算? 请教-这是否是转化率的问题
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