大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞促销
编号：BTN120520
规格：10*100μl
英文名：E.coli OrigamiB(DE3) Chemical Competent Cell
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
 本产品是采用大肠杆菌Origami B(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品，转化效率可达107。本感受态细胞具有卡那霉素和四环素抗性。
 菌株基因型为：F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1 ahpC(DE3)gor522::Tn10trxB(KanR,TetR)。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

关于大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞促销的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·荧光素标记的生物素
编号：BTN131093
英文名称：FITC-Biotin
规格：5mg
本产品为荧光素标记的生物素，激发波长492nm，发射波长510nm。颜色为黄绿色。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·牛血清γ球蛋白标准品(2mg/mL)
编号：BTN131071
英文名称：Bovine γ IgG Standard
规格：1mL
牛血清γ球蛋白标准品(BGG)经过滤除菌，质量稳定。本产品是考马斯(Bradford)分析实验的理想标准品，是使用任何方法测定抗体浓度的理想标准品。本产品浓度为2mg/mL。本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

自备试剂：0.9% NaCl溶液或PBS缓冲液、BCA工作液。

使用方法：
本产品可应用于蛋白分析定量(BCA蛋白分析、考马斯-Bradford分析等)、抗体脱盐回收或其他层析操作的对照、SDS-PAGE电泳和分光光度计紫外灯的常规校准(吸收峰在280nm)等实验。由于蛋白操作彼此差别太大，本手册只列出此产品用于BCA蛋白分析的实验流程，其他流程不在此详述。

1．标准品溶液的稀释方法见下表。此标准品溶液的稀释可使用去离子水、0.9% NaCl或PBS。

 

2mg/mL本品(μL)	稀释液(μL)	稀释后产品终浓度(μg/mL)
120	0	2000
90	30	1500
60	60	1000
45	75	750
30	90	500
15	105	250
10	110	125
0	120	0(空白对照)

2．本产品标准曲线的制备
1)分别取50μL稀释后的本标准品溶液加入到1.5mL离心管中，每个浓度取2个平行样。
2)在每管中各加入1mL工作液后，立即混匀。
3)37℃水浴槽中反应30分钟后，冷却至室温。
4)使用分光光度计测定562nm处的吸光度值。测定时，使用1mL比色皿，用水校零。尽可能在20分钟内检测完毕所有样品。
5)各浓度本标准品溶液的吸光度值减去空白对照的平均值，绘制本标准品溶液的标准曲线。
3．检测样品的测定
 检测样品建议与本标准品溶液同时进行测定，测定方法同上，与本标准品的测定方法一致。如果必要也可选择与本标准品溶液相同的稀释方法稀释检测样品后测定。



大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞促销关键词：DE3,BTN120520,大肠杆菌OrigamiB,E.coli OrigamiB(DE3) Chemical Competent Cell,大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞


·FTA卡血液样品DNA提取试剂盒
编号：BTN130933
英文名称：FTA blood sample DNA extraction kit
规格：50次

·质谱兼容型蛋白银染试剂盒
编号：BTN100811
英文名称：MS-Comp*(代"a")tible Silver Stain for Protein
规格：10次
银染是目前检测PAGE电泳分离后的蛋白质的最灵敏的方法，MS(质谱)是确定未知蛋白最常用和最快捷的方法，但将银染得到的蛋白直接用于MS分析有很多问题，其中最主要问题是常规银染所使用的试剂(包括强氧化剂和醛类)容易使蛋白质发生化学修饰，这样MS分析得到的*基酸信息跟蛋白质实际的*基酸信息并不相同。为了使银染得到的蛋白质可以用于MS分析，为此本公司开发MS 兼容型银染试剂盒。

产品特点：
1．跟MS 兼容，原理是避免使用能化学修饰蛋白质的试剂，所得蛋白质没有发生化学修饰，故可直接用于后续的MS(包括MALDI-TOF-MS和ESI-MS)分析。
2．银染的灵敏度比考马斯亮蓝染色高100倍左右，可达0.2-0.6ng蛋白质/条带。
3．可用于各种PAGE胶，包括变性PAGE胶(如SDS-PAGE，尿素-PAGE)，非变性PAGE胶，IEF胶(等电电泳胶)，2D胶等。
4．四种溶液都是现用现配，实验结果的可重复性好。

产品组成：

成分	规格
溶液A组分一干粉	1份
溶液A组分一溶剂	100ml
溶液A组分二干粉	10份
溶液B干粉	5g
溶液C组分一干粉	10份
溶液C组分二	2ml
溶液D干粉	10份
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

准备工作：
所有溶液均需现配现用。以下按一块PAGE胶需要200mL溶液配制，用户可以根据自己PAGE胶的大小增减溶液的用量。
一、用自备试剂配制400mL固定液(按一次银染需要固定2次计算，每次固定需200mL固定液)
将160mL甲醇、40mL乙酸和200mL去离子水充分混合后即得400mL固定液。
二、配制200mL溶液A
先配制溶液A组分一储备液：将溶液A组分一干粉加入到100mL溶液A组分一溶剂中，充分摇晃溶解即得溶液A组分一储备液。此溶液可以4℃保存。将60mL甲醇、8mL溶液A组分一储备液、1 份溶液A组分二(干粉)和132mL 去离子水充分混合后即得200mL溶液A。
三、配制200mL溶液B
称0.5g溶液B干粉，溶于200mL 去离子水中，充分混合后即得200mL溶液B。
四、配制200mL溶液C
将1 份溶液C(干粉)溶解在200mL 去离子水中(干粉不容易溶解，需搅拌)即得溶液C。注意：使用前还需要再加入160μL溶液C组分二并充分混匀。
五、配制200mL溶液D
将1 份溶液D(干粉)溶解在200mL 去离子水中即得溶液D。

银染：
1．PAGE电泳(包括非变性PAGE，SDS-PAGE，尿素-PAGE，2D-PAGE，IEF-PAGE等)结束后，将PAGE胶转移到装有200mL 固定液的瓷盘或玻璃盘中，摇晃30分钟以去除干扰银染的组分(如甘*酸、SDS、尿素、DTT、甘油等)，倒掉固定液。注：此步很重要，否则银染背景很高。
2．重复上步一次。
3．将PAGE胶转移到200mL溶液A中，室温摇晃30分钟。
4．用200mL 去离子水漂洗3次，每次5分钟(不要延长或缩短)。
5．将PAGE胶转移到200mL的溶液B中，室温摇晃20分钟。
6．用200mL 去离子水漂洗2次，每次1分钟(不要延长或缩短)。
7．将PAGE胶转移到200mL的溶液C中，室温摇晃直到蛋白电泳条带显现(一般需要10分钟左右)。
8．将PAGE胶转移到200mL的溶液D中，室温摇晃终止反应。
9．用200mL 去离子水漂洗3次，每次5分钟(不要延长或缩短)。
10．切下条带或胶块进行后续的脱银，原位trypsin酶解，多肽沉淀和MS分析(略)。

技术资料：
MS前处理步骤(仅供参考)
1．脱银：将切下的银染斑点或条带用脱银液(30mM K3Fe(CN)3和100mM Na2S2O3的1：1的混合液)处理直到黑色消失。
2．还原：将胶块或胶条置于10mM DTT(溶剂为50mM NH4HCO3)，56℃处理一小时。
3．烷化：将胶块或胶条置于55mM 碘乙酰胺(溶剂为50mM NH4HCO3)，室温避光处理45分钟。
4．原位trypsin酶解：将胶块或胶条置于10 ng/uL 测序级别的trypsin溶液中(溶剂为25mM NH4HCO3)，37℃处理过夜。
5．多肽提取：用5%三*乙酸抽提酶解液，再用2.5%三*乙酸-50%ACN 混合液抽提酶解液，上清真空干燥，沉淀(多肽)最后溶于0.5%三*乙酸中。
6．MS分析：参考相关MS仪器使用手册。


大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞促销关键词：DE3,BTN120520,大肠杆菌OrigamiB,E.coli OrigamiB(DE3) Chemical Competent Cell,大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞

2,6-二**醌*亚胺 HBTU 537-45-1
微量样品基因组DNA提取试剂盒(毛发/血渍/漱口水) 
59-30-3 叶酸(维生素B9)Folic acid(Vitamin M)
CYB161070 人血清IgA(液体)70～80%纯度,4mg/ml浓度
原位杂交A-B显影液   2×500ml
ARB14257 猪补体4(C4)elisa测定使用说明书 
BTN130681 通用 miRNA克隆接头 Universal miRNA Cloning Linker
BL0952 胶体金标记羊抗兔IgG抗体
偏钒酸* BUCHE 16519-65-6
BL1308 Taq DNA Polymerase(含10x PCR buffer,预混*化*)
BL1124 EDTA抗原修复液(1×)
CYB162004 兔抗人纤维蛋白原(抗血清) 0.5ml
143-74-8 *酚红 Phenolsulfonphthalein
通用细胞冻存液   50ml

我公司正在打折促销克隆与表达全系列产品，恭候您的咨询选购大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞促销。