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- 保存条件:
干冰运输、-80℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
E.coli TB1 Rosetta Competent Cell
- 库存:
818
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌TB1感受态细胞打折促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:大肠杆菌TB1感受态细胞打折促销
英文名:E.coli TB1 Rosetta Competent Cell
规格:10*100μl
产地:国产|进口
编号:BTN140645
品牌:百奥莱博
本感受态细胞来源于JM 83,是JM 83 hsdR型,只含有大肠杆菌RNA polymerase,缺少BL21(DE3)菌株的T7 RNA polymerase,适合NEB公司的pMAL 系列质粒原核蛋白表达(The pMAL vectors use the E. coli RNA polymerase),不能用于pET 系列质粒的表达,具有链霉素抗性。TB1感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
菌株基因型:F– ara Δ(lac-proAB)rpsL(Strr)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15] thi hsdR。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴25分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中并静置2-3分钟,晃动会降低转化效率。
4. 每个离心管中加入700μl 无菌的2YT或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μL左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
6. 将平板倒置于37℃培养箱中培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM 均可)。
4. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
大肠杆菌TB1感受态细胞打折促销正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·PVDF膜(0.45μm,13×20cm)
编号:BTN101123
英文名称:PVDF Membrane (Millipore)
规格:1张
聚偏*乙*(代"烯")(PVDF),是一种高强度、耐腐蚀的物质,可以结合蛋白质,而且可以分离小片段的蛋白质。使用PVDF膜前,需要先用无水甲醇预处理,再在transfer buffer中平衡方可使用,目的是活化PVDF膜上面的正电基团,使它更容易跟带负电的蛋白质结合。
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
·小鼠基因组DNA
编号:BTN131033
英文名称:Mouse Genomic DNA
规格:100μg
本产品为小鼠基因组DNA,是从无疾病小鼠全血中分离到的。利用脉冲电场凝胶电泳测量,90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括 PCR)及基因组文库构建等实验。
储存条件:低温运输、4℃保存、有效期一年。
·酵母tRNA溶液(精提)
编号:BTN70904B
英文名称:Yeast tRNA Solution
规格:1.5mL
本产品分A和B两个规格,浓度均为5mg/mL。A是酵母tRNA粗提液,用作制备更高纯度(如分子生物级)酵母tRNA的原材料。B是精提液,是经过本公司柱式RNAadsorp纯化的分子生物学级别的酵母tRNA溶液,不含蛋白质和DNA污染,OD260/OD280在1.9左右,可直接用作微量RNA提取和回收的助沉剂,也可以用作原位杂交、Northern杂交的封堵剂,对于探针为RNA的杂交试验尤其适用。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:以tRNA粗提液(BTN70904A)为材料,酚法制备tRNA精提液(BTN70904B)
1.在1倍体积的tRNA粗提液中加入一倍体积的自备Tris饱和酚,振荡混匀后12000~15000g离心3分钟得上清。
2.在上清中再加入一倍体积的自备Tris饱和酚和0.2倍体积自备的*仿,振荡混匀后12000~15000g离心3分钟得上清。
3. 重复此步直到酚相和水相之间没有白膜出现。一般需要2-4次抽提。
4.在上清中加入0.1倍体积的自备3M NaAc(pH5.2)和2倍体积的自备无水乙醇,振荡混匀。
5. 12000~15000g离心15分钟以上,小心移弃上清。
6. 用1mL自备 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇,振荡混匀后12000~15000g离心5分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体,所得沉淀即是精提的酵母tRNA,可以溶解在自备的DEPC水中,UV测定其浓度,然后直接用于各种分子生物学实验。
注意:tRNA比较短,又是单链,所以电泳时结合EB等染料的能力很弱,测定其浓度时最好不要使用电泳比较法,而要使用分光光度法。
注意:此法得率较高,但缺点是不能去除部分多糖污染,因为多糖也能在醇沉淀时沉淀下来。如果最后得到的溶液带颜色,则需要用本公司柱式RNAadsorp精提,详细过程见该产品使用说明书。
二:tRNA精提液(BTN70904B)作为核酸助沉剂
1.在核酸(DNA或/和RNA)溶液中,加入适当浓度的盐离子,盐离子不同其终浓度也不相同,具体如下:
| 盐 | 终浓度 |
| NH4OAc(醋酸铵) | 0.5M |
| NaCl(*化*) | 0.25M |
| NaOAc(醋酸*) | 0.3M |
2. 加入本产品使其终浓度为20μg/mL,混合均匀。
3. 加入两倍体积的乙醇,混合均匀。
4. 冰上放置15分钟。
5. 12000~15000g离心15分钟以上,小心移弃上清。
6. 用1mL 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇,振荡混匀后12000~15000g离心5分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体。
8. 将沉淀溶于适当缓冲液中待用。
注:由于tRNA是多聚核苷酸激酶和末端转移酶的底物,因此如果回收的DNA或RNA要用于此类反应,就不能使用tRNA作为助沉剂。如果回收的RNA要用于RT-PCR,使用tRNA可能会对反应的特异性产生干扰。
三:tRNA精提液(BTN70904B)作为杂交封堵剂
本产品可以作为原位杂交、Northern杂交和RNA斑点杂交的封堵剂,也可以作为Southern杂交和DNA 斑点杂交的封堵剂,但不适于作为菌斑杂交。其在杂交液或预杂交液中的终浓度为100μg/mL。
如果使用RNA探针,最好使用本产品做封堵剂,以保护RNA探针。
大肠杆菌TB1感受态细胞打折促销关键词:大肠杆菌TB1感受态细胞,E.coli TB1 Rosetta Competent Cell,BTN140645
·MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒
编号:BTN140634
英文名称:MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit
规格:500次
MTS是一种新型甲臜化合物,和MTT同属四唑氮衍生物。MTS能被活细胞里的线粒体脱*酶降解而产生棕黄色水溶性的甲臜,通过测定甲臜的光谱吸收,进而可以测定细胞的增殖情况。原理如下:
产品特点:
1.本试剂盒是单溶液式细胞增殖与细胞毒性检测试剂,主要成分包含MTS和一个电子耦合试剂,溶液的稳定性强,反应的灵敏度高。
2.操作简便、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤。
3.无放射性。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物。
4.与MTT相比,使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物。
5.操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期半年。
使用效果:
96孔板中加入细胞100μL/孔(约1×104),37℃,5% CO2细胞培养箱培养24小时,加入适当浓度的受试化合物。培养箱中孵育适当时间,每孔中加入10μL的MTS细胞增殖及毒性检测溶液。37℃孵育1-4小时。490nm波长检测光密度。
备忘录:
1.细胞的存活率:将各测试孔的OD值减去本底OD值(完全培养基加MTS细胞增殖及毒性检测溶液,无细胞)或空白药物孔OD值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTS细胞增殖及毒性检测溶液,无细胞),各重复孔的OD值取均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T为加药细胞的OD值,C为对照细胞的OD值。
细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
2.求出T/C = 50%时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
大肠杆菌TB1感受态细胞打折促销关键词:大肠杆菌TB1感受态细胞,E.coli TB1 Rosetta Competent Cell,BTN140645
ARB13173 小鼠破骨细胞分化因子(ODF)血清中含量检测 Mouse osteoclast differentiation factor,odf ELISA KIT
*亚磺酸* Ribostamycin Sulfate salt 873-55-2
BL1417 "Western blotting(小鼠/兔IgG)
ARB10109 人H-*粘连蛋白(HCDH13)含量测试 Human e-cadherin,h-cad/cdh13 ELISA KIT
多聚半乳糖醛酸* Sulforhodamine B 9049-37-0
BL1104 10%过硫*(代"酸")*
F040310 小鼠IgG3抗原 Mouse IgG3
SJ0809 D(+)鼠李糖
ARB10933 人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA代测服务 Human indoleamine 2,3-dioxygenase,ido ELISA KIT
D-半胱*酸 Tetraheptylammonium bromide 921-01-7
ARB10606 人血红素氧化酶1(HO-1)酶免分析 Human heme oxygenase 1,ho-1 ELISA KIT
BTN130513 无包被磁珠 Magnetic beads,Plain
硫代甜菜碱8 BOC-D-Glutamic acid 15178-76-4
C1001 猪血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
9002-93-1 Trion X-100 曲拉通X-100
ARB11699 人硫*(代"酸")类肝素(HS)elisa检测 Human heparan sulfate,hs ELISA KIT
ARB11288 人*离子通道抗体(VGCC)Elisa方法检测 Human voltage-gated calcium channel,vgcc ELISA KIT
ARB11242 人毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M3(M-AChR M3)Elisa分析 Human muscarinic acetylcholine receptor m3,m-achr m3 ELISA KIT
HC0321 Genex8道可调移液器
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