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        【求助】请问关于TOP10F'的问题,多谢!

        丁香园论坛

        2985
        请问丁香园里的战友们,谁做过点突变?TOP10F'是不是甲基化菌株?恳请指教,多谢啦!:)有请好人帮我分析下TOP10F'菌株是否有甲基化功能,因为我要做点突变,如果这个菌株具有甲基化外源质粒DNA的功能就可以了,以下是此菌株对应的基因型,多谢啦!:)

        F'{lac Iq Tn10(TetR)} mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 △lacⅩ74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rps (Strr) endA1 nupG
        会甲基化的
        你的意思是如果质粒转化进去后就能被这个菌株里面的甲基化修饰酶把质粒甲基化吗?我从这个菌里提出的质粒会含有甲基化位点可以被我的DpnI消化掉是吗?可是看到Δ(mrr-hsd RMS-mcrBC)好像是缺失掉了甲基化修饰酶,Δ 不是表示缺失吗?还请再给详细解释下,谢谢啦!
        dam表达DNA腺嘌呤甲基化酶,dcm表达DNA胞嘧啶甲基化酶。从基因型可以看出,TOP10的dam和dcm甲基化酶均没有发生突变或缺失,所以能够甲基化外源质粒。
        mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC) 是限制系统。

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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