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- Cmbio
- 南京
- CM-6065G
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
零下80度
- 保质期：
1年
- 英文名：
TOP10F´ Chemically Competent Cell
- 库存：
1000只
- 供应商：
南京赛泓瑞生物
- 规格：
20*100ul
AH109酵母感受态细胞
AH109 Chemically Competent Cell产品编码： 保存条件： -80℃
产品规格:
| AH109 | 20×100μl | 保存条件：-80℃ |
| PGADT7（control vector） | 10ng/μl 10μl | 保存条件： 4℃ |
| Carrier DNA | 5ug/μl 100 μl | 保存条件 -20℃ |
| PEG/liAC | 5 ml | 保存条件： 4℃ |
AH109酵母感受态细胞基因型：
MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ,LYS2 : : GAL1UAS-GAL1TATA-HIS3, MEL1 GAL2UAS-GAL2TATA-ADE2, URA3::MEL1UAS-MEL1TATA-lacZ
AH109酵母感受态细胞简要说明：
AH109菌株来源于PJ69-2A 酵母菌株，将lacZ报告基因引入PJ69-2A诞生了AH109，此菌株是Clontech公司开发的GAL4系统酵母双杂实验用菌株，MATa型，可直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过mating操作进行蛋白互作验证或筛库试验。
AH109酵母感受态细胞操作说明：
- 取100 μl冰上融化的AngYuBio AH109感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5ug，Carrier DNA（95-100度5min,快速冰浴，重复一次）10 ul ，PEG/LiAc 500ul并吸打几次混匀，30度水浴30 分钟（15 min时翻转6-8次混匀）。
- 将管放42度水浴15min（7.5 min时翻转6-8次混匀）。
4. ddH2O 50ul重悬，涂板,29℃培养48-96h。
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文献和实验Yeast Two-Hybrid Screening to Test for Protein–Protein Interactions in the Auditory System
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短片段（5kb 以内）的序列克隆成功率。对于提高大片段克隆的成功率，可以从以下几方面考虑： ①选择合适的克隆载体，例如 pCC1-Brick 等适合装载大片段的载体； ②选择合适的克隆方法，通常无缝克隆技术如 Gibson 组装或者 Golden Gate 克隆对于大片段的组装效率更高； ③选择合适的纯化方式，纯化目的基因片段和线性化载体片段后再使用，并且注意两者的使用比例； ④选择合适的大肠杆菌感受态细胞，例如 stbl3，JM109 等； ⑤挑选单克隆菌落时需要注意，成功重组大片段的阳性单克
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