- ¥180 - 1850
- YBscience
- YB115-100S
- 进口/国产
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
AH109酵母感受态细胞
- 保质期：
三年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
10×100ul / 20×100ul
AH109酵母感受态细胞
| 产品编码 | 产品名称 | 规格 |
| YB115-100S | AH109酵母感受态细胞 | 10*100ul |
| YB115-100 | AH109酵母感受态细胞 | 20*100ul |
AH109 Chemically Competent Cell 产品说明书:
产品规格:
AH109： 10×100μl 保存条件：-80℃
PGADT7（control vector）：10ng/μl 10μl 保存条件： 4℃
Carrier DNA： 5ug/μl 100 μl 保存条件： 4℃
PEG/liAC： 5 ml 保存条件： 4℃
DMSO： 300 ul 保存条件： 4℃
AH109酵母感受态细胞基因型
MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ;,LYS2 : : GAL1UAS-GAL1TATA-HIS3, MEL1 GAL2UAS-GAL2TATA-ADE2, URA3::MEL1UAS-MEL1TATA-lacZ
AH109酵母感受态细胞产品说明
本公司AH109感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株，MATa型，可转化质粒或mating操作，Transformation marker为: trp1, leu2，报告基因为：HIS3, ADE2, lacZ, MEL1，经PGADT7质粒检测转化效率为104cfu/μg DNA 。
AH109酵母感受态细胞操作方法
1. 取100μl冰上融化的Y2HGold感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5ug，Carrier DNA（95-100度5min,快速冰浴，重复一次）12 ul ，PEG/liAC 500ul并吸打几次混匀，30度水浴30 分钟（15 min翻转6-8次混匀）。
2. 加入DMSO 30ul 轻轻混匀。
3. 将管放42度水浴15min （7.5 min翻转6-8次混匀）。
4. 5000 rpm 离心 40s 弃上清，ddH2O400ul 重悬，离心 30s 弃上清。
5. ddH2O 50ul重悬，涂板。
AH109酵母感受态细胞注意事项
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。
提示：不可用于临床治疗。
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文献和实验相关专题 酵母感受态细胞制备可以：(1)用于建立酵母转化体系;(2)用于酵母表达系统 构建;(3)用于酵母其他分子生物学研究。 一、试剂与耗材 1. 试剂 细菌用-酵母提取物(Fisher)、 细菌用-蛋白胨(Fisher)、葡萄糖(Fisher)、细菌用-琼脂粉、去离子水、甘油(Sigma)、二甲基亚砜(Sigma)、聚乙二醇3350(Sigma)、醋酸锂(Sigma)、鲑鱼精子细胞DNA
1.5ml缓冲液B，彻底混匀； 30℃水浴孵育1h； 室温下2000g离心10min，去除上清液，菌体沉淀重悬于1.5ml缓冲液C中； 离心样品，去除上清液，轻微操作将样品重悬于0.2ml缓冲液C中； 将所有转化液铺于选择性平板，于30℃孵育3～4天后，鉴定； 3、毕氏酵母电转化法 （1）E.coli TOP10F’感受态细胞的制备 取10ul TOP10F’菌液，接种于200ml LB液体培养基中活化培养，37℃，200 rpm，16～18小时。取100ul菌液接种于200ml液体LB
酿酒酵母感受态细胞的制备 （1）从YPD平板上挑取一个新鲜的酿酒酵母EBY100单克隆至10 ml YPD液体培养基，30℃，250 rpm 培养过夜。 （2）测定过夜培养物的OD600值为3.0~5.0之间。 （3）将10 ml YPD过夜培养物稀释至OD600值为0.2~0.4。 （4）在28~30℃摇床中继续培养3~6 hr，使其OD600值达到0.6~1.0。 （5）于室温1500 g 离心5 min 收集酵母细胞，弃上清。 （6）用10 ml 洗液洗酵母
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