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- 2025年07月11日
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上海禾午生物科技有限公司
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51-17-2
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分析标准品,HPLC≥98%
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文献和实验起亲电取代反应。由于共轭体系中的6个π电子分散在5个原子上，使整个环的π电子云密度较苯大，比苯容易发生亲电取代。同时，α位上的电子云密度较大，因而亲电取代反应一般发生在此位置上，如果α位已有取代基，则发生在β位。 与苯比较，环的芳香稳定性不如苯环，电子云密度分布也不完全平均化。由于杂原子电负性大小不同（O＞N＞S），电子云离域有差异，所以它们的芳香性强弱有差异，环的稳定性也不同。 含有两个杂原子（其中至少有一个氮原子）的五元杂环称为唑。常见的有咪唑、吡唑和噻唑
HIS 标签蛋白纯化效果不理想，宝宝心里苦呀。今天，小编来跟大家一起找找原因。 纯化所得组分中没有收集到重组的 HIS 标签蛋白。该问题主要可以分为以下两个方面： 1、HIS 标签蛋白没有结合到填料上就流穿了 原因一 超声的功率不对。超声功率过高，容易导致蛋白炭化；功率过低，蛋白释放不出来。 建议 改变超声功率，同时可以在超声前加入溶菌酶。 原因二 结合缓冲液条件不合适。 建议 检查结合缓冲液中是否有影响结合的因素，如：金属离子螫合剂、强还原剂、过高的咪唑浓度。同时，优化缓冲
一 洗脱条件太温和。 建议 增加咪唑的浓度或选择咪唑线性梯度洗脱，或者通过降低pH寻找最佳洗脱条件。需要注意的是，pH低于3.5容易导致镍离子脱落。 原因二 蛋白柱上沉淀。 建议1 降低蛋白浓度。可以减少上样量，或者采用咪唑线性而非步级梯度洗脱，增加蛋白稀释度。 建议2 试用去污剂或者改变NaCl的浓度，或者使用变性剂（4-6M盐酸胍或4-8M尿素）在变性条件下洗脱。 原因三 非特异性的疏水或者其他相互作用。 建议 加非离子型去污剂到洗脱缓冲液（如：2% Triton X-100）或增加NaCl的浓度
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