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- 2025年07月14日
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57
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详见说明书
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详见说明书
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
-20℃或-80℃
- 规格：
50 次
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
一步法单菌落质粒 DNAout50 次规格介绍：
一步法单菌落质粒 DNAout50 次规格存新鲜组织样品：
1. 估计完全浸没样品所需要 RNALOCKER 的体积（1g 组织需 10 mL） RNA。
2. 标记收集管并加入估计所需量的 RNALOCKER。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎块。注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存，有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
一步法单菌落质粒 DNAout50 次规格实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:5:24:1)抽提两次(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是一步法单菌落质粒 DNAout50 次规格的相关产品正在热销:
RASSF5 RASSF5抗体规格: 0.2ml
Phospho-CHEK1 (Ser296) 磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体规格: 0.1ml
C11ORF77/HARBI1 11号染色体开放阅读框77抗体规格: 0.2ml
FLIP delta + gamma 凋亡调节蛋白δ+γ抗体规格: 0.2ml
BTG4 B细胞迁移基因4抗体规格: 0.2ml
Axin1 轴蛋白1抗体规格: 0.1ml
GDF9 生分化因子9抗体 0.1ml
Phospho-JunB (Thr102/Thr104) 磷酸化活化蛋白激酶B抗体规格: 0.2mlCD171/NCAM-L1 神经细胞粘附分子配体1抗体规格: 0.1ml
factor VIII(FVIII) 第八因子相关抗原抗体规格: 0.1ml
ATRIP/TREX1 系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体规格: 0.2ml
5HTR2C 5-羟色胺受体2C抗体 0.2ml
一步法单菌落质粒 DNAout50 次规格BSA[=N,O-双(三甲基硅基)乙酰胺](>75.0%(GC)) CAS: 10416-59-8 英文名称 N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide 质量规格：>75.0%(GC)
BSTFA[=N,O-双(三甲基硅基)三氟代乙酰胺](>95.0%(GC),用于气相色谱)
CAS: 25561-30-2 英文名称 N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide 质量规格：>95.0%(GC)
TMS-咪唑(=N-三甲基硅基咪唑)(>98.0%(T)) CAS: 18156-74-6 英文名称 TMS-Imidazole (=N-Trimethylsilylimidazole) 质量规格：>98.0%(T)
N,O-双(三甲硅基)乙酰胺(>75.0%(GC)) CAS: 10416-59-8 英文名称 N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide 质量规格：>75.0%(GC)
N-甲基-N-三甲硅基乙酰胺(>92.0%(GC)) CAS: 7449-74-3 英文名称 N-Methyl-N-TMS-acetamide 质量规格：>92.0%(GC)
N-三甲基硅基咪唑(>98.0%(T)) CAS: 18156-74-6 英文名称 N-Trimethylsilylimidazole 质量规格：>98.0%(T)
N-三甲基硅基乙酰胺(>98.0%(GC)) CAS: 13435-12-6 英文名称 N-Trimethylsilylacetamide 质量规格：>98.0%(GC)
1,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC)) CAS: 15933-59-2 英文名称 1,1,3,3-Tetramethyldisilazane 质量规格：>97.0%(GC)
1-(叔丁基二甲硅基)咪唑(>98.0%(T)) CAS: 54925-64-3 英文名称 1-(tert-Butyldimethylsilyl)imidazole 质量规格：>98.0%(T)
N,O-双(叔丁基二甲硅基)乙酰胺(>95.0%(GC)) CAS: 82112-21-8 英文名称 N,O-Bis(tert-butyldimethylsilyl)acetamide 质量规格：>95.0%(GC)
1-(二甲基异丙基硅基)咪唑(>98.0%(T)) CAS: 81452-04-2 英文名称 1-(Dimethylisopropylsilyl)imidazole 质量规格：>98.0%(T)
一步法单菌落质粒 DNAout50 次规格服务流程：
1）客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
非冻型组织 RNA 保存液250mL图片客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作
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文献和实验大肠杆菌(Escherichia coli)是分子遗传学实验、基因工程操作中广泛采用的一种受体菌，它的遗传背景研究的比较详细，常用做寄主进行基因扩增及外源基因的表达。 一. 实验目的 : 掌握大肠杆菌的对照培养、单菌落的分离及菌种保存方法。 二. 实验原理 : 大肠杆菌除本身的核染色体外，往往还含有质粒(Plasmid)DNA，这是一种双链闭合环状
，能够生长的菌株就是成功转化的。说了这么多，我们怎么得到这么好的质粒呢？下面我想大家介绍一种最经典，也是最灵活的质粒提取步骤和每个步骤的原理。细菌的培养1. 从琼脂 LB 平板上挑取单菌落，接种到液体 LB 培养基中，过夜培养。Tips：菌体里的质粒一般含有抗生素抗性基因，在细菌培养过程中要向培养基中加入相对应的抗生素，以防质粒丢失。细菌的收获，裂解细菌的收获一般通过离心进行，而细菌的裂解有多种方式，包括离子型 / 非离子型去污剂，有机溶剂，或者碱裂解，加热等。选择哪一种方式主要看质粒的大小，大于
.Na2,（pH8.0）2. 细菌裂解液: 0.2 mol/L NaOH，1% SDS3. 中和液: 60 mL 5M 醋酸钾，11.5 mL 冰醋酸，28.5 mL 双蒸水4. 3 mol/L NaAc (pH 5.2)5. TE 饱和酚 (pH8.0)6. 氯仿/异戊醇 = 24:17. RNase（20 mg/mL）【实验方法与步骤】（一）质粒的小量制备:1. 将 5 mL LB 培养液 (含筛选抗生素) 加入到容量为 15 mL 并通气良好的试管中，然后将转化菌的一个单菌落接种于培养
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