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柱式质粒 DNAout50 次规格

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  • 上海莼试
  • CS-89268
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  • 2025年07月12日
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      上海莼试

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    • 规格

      50 次

    柱式质粒 DNAout50 次规格介绍:
    产品细节图片1
    柱式质粒 DNAout50 次规格存新鲜组织样品:
    1. 估计完全浸没样品所需要 RNALOCKER 的体积(1g 组织需 10 mL) RNA。
    2. 标记收集管并加入估计所需量的 RNALOCKER。
    3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎块。注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
    公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
    1、RNA纯化系列产品
    2、DNA纯化系列产品
    3、电泳及回收系列产品
    4、探针标记及检测系列产品
    5、核酸扩增系列产品
    6、克隆表达系列产品
    7、基因组研究系列产品
    8、蛋白质研究系列产品
    9、细胞生物学研究系列产品
    10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
    柱式质粒 DNAout50 次规格服务流程:
    1)客户提供材料
    2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
    非冻型组织 RNA 保存液250mL图片客户提供:
    新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
    4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
    详细的背景资料:来源、特点、类型等
    我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
    质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作
    以下是柱式质粒 DNAout50 次规格的相关产品正在热销:
    Phospho-ATP1A1(Tyr10)  磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体规格: 0.1ml

    Phospho-PSD93 (Tyr340)  磷酸化突触后密度蛋白93抗体规格: 0.1ml
    ANKHD1  艾滋病病毒制约锚定蛋白抗体规格: 0.2ml
    Goat Anti-rat IgG/Cy5  Cy5标记的羊抗大鼠IgG规格: 0.1ml
    Rap2A  Rap2A抗体规格: 0.2ml
    Thymosin beta 4  胸素β4抗体规格: 0.2ml
    Phospho-PLC gamma 1/PLCG1(Tyr775)  磷酸化磷酯酶Cγ1抗体规格: 0.1ml
    LC3B/MAP LC3β/MAP1A  自噬微管相关蛋白轻链3抗体规格: 0.1mlPhospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106)   磷酸化雌激素受体α抗体规格: 0.1ml
    Collagen III  抗Ⅲ型胶原抗体规格: 0.1mlDonkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的驴抗人IgG规格: 0.1ml
    X protein/HB-X (middle)  抗乙肝病毒X蛋白抗体规格: 0.2mlTRAILR1/DR4/APO2  死亡受体4抗体规格: 0.1ml
    Phospho-CENP-A (Ser7)  磷酸化着丝粒蛋白A规格: 0.1mlNCX1/SLC8A1  钠钙交换蛋白1抗体规格: 0.1ml
    柱式质粒 DNAout50 次规格四丁基碘化铵(离子对色谱级) CAS:  311-28-4 英文名称  Tetrabutylammonium iodide 质量规格:离子对色谱级
    三辛胺(离子对试剂) CAS:  1116-76-3 英文名称  Trioctylamine 质量规格:离子对试剂
    草酸钠容量分析用溶液标准物质(0.05M) CAS:  62-76-0 英文名称  Sodium oxalate solution 质量规格:0.05M
    刚果红(分析标准品,≥97.0%(HPLC)) CAS:  573-58-0 英文名称  Congo red 质量规格:分析标准品,≥97.0%(HPLC)
    正癸酸(分析标准品,≥99.5%(GC)) CAS:  334-48-5 英文名称  Decanoic acid 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC)
    甲基反亚油酸甲酯(分析标准品) CAS:  2566-97-4 英文名称  Methyl linolelaidate 质量规格:分析标准品
    肉豆蔻酸甲酯(分析标准品,≥99.5%(GC)) CAS:  124-10-7 英文名称  Methyl myristate 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC)
    棕榈酸甲酯(分析标准品,≥99.0%(GC)) CAS:  112-39-0 英文名称  Methyl palmitate 质量规格:分析标准品,≥99.0%(GC)
    亚麻酸甲酯(标准品) CAS:  301-00-8 英文名称  Methyl linolenate 质量规格:分析标准品
    十一酸甲酯(标准品) CAS:  1731-86-8 英文名称  Methyl undecanoate 质量规格:分析标准品
    十九酸甲酯(标准品) CAS:  1731-94-8 英文名称  Methyl nonadecanoate 质量规格:分析标准品
    柱式质粒 DNAout50 次规格实验步骤
    (1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
    (2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
    (3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
    (4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
    (5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
    (6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
    (7)10,000rpm,4℃离心20min
    (8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
    (9)酚:5:24:1)抽提两次(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
    (10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
    (11)12,000rpm,4℃离心20 min
    (12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
    (13)加200ul的DEPC处理水溶解
    (14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
    (在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)


     

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      理想。 我一共做过四五个重组质粒,其中插入片段,大的有2000bp左右的,小的也有200bp左右的。其中200bp~900bp的不大不小的片段相对好做,2000bp的难度相对较大。而其中最难做的恐怕就是ShRNA表达质粒了,RNAi技术这些年是一个热点,但是把一个只有63bp的小片断DNA插入到4000bp~5000bp的质粒DNA当中,并不是一件容易的事情。期间我们做了近百的尝试,总结出这么一些经验: 1、质粒酶切方式的选择。现在看来,如果质粒的条件允许,最好选择双酶切。因为双酶切操作相对简单

    • 还在用试剂盒提取质粒的你,懂得它背后经历了什么吗?

      mmol/L Tris HCl(pH8.0)10 mmol/L EDTA(pH8.0)Tips:这一步主要作用是重悬菌体,EDTA 是金属螯合剂,主要作用是防止下一步的裂解过程中内切酶对质粒进行切割。4. 加入 200ul 新配置的溶液 II,盖紧管口,快速颠倒离心管 5 ,切勿震荡,将离心管置于冰上。溶液 Ⅱ0.2 mol/L NaOH(临用前用 10 mol/L 贮存液现用现稀释)1% SDS Tips:菌体在强碱性条件下裂解,释放出包括质粒在内的核酸,蛋白等物质。注意混匀要轻柔

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