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- 详细信息
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- 库存:
83
- 英文名:
C-mCherry plasmid(with CMV promoter)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1μg
特别提示:包括C端mCherry标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:C端mCherry标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)
英文名称:C-mCherry plasmid(with CMV promoter)
产品货号:YT467
产品规格:1μg
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含mCherry (DsRed的突变体,一种非常明亮的红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个mCherry的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有mCherry标签的融合蛋白。利用mCherry的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用mCherry抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。mCherry与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测mCherry。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Multiple cloning site | 651-736 |
| mCherry | 741-1451 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1501-1522 |
| SV40 polyAsignal | 1534-1917 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2055-2361 |
| bla promoter | 2386-2510 |
| SV40 promoter | 2530-2868 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2903-3694 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3695-4153 |
| pUC origin | 4282-4949 |
本质粒(5001bp)的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
除了C端mCherry标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白),,我公司还供应以下相关产品:
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN60603 | 即用型蓝白T载体A型(T7-SP6,有MCS) | 20次 |
| BTN140376 | 大肠杆菌XL2-Blue感受态细胞 | 10*100μl |
| BTN70602 | DNA快速连接试剂盒 | 100次 |
| BTN90801A | 一站式TA克隆试剂盒 | 20次 |
| YT448 | GRE荧光素酶报告基因质粒(糖皮质激素响应元件) | 1μg |
| YT488 | 10×YTM Buffer(与NEB CutSmart Buffer成分相同) | 5ml |
| ALH347 | T Simple 载体连接试剂盒(不含多克隆位点) | 20次|60次 |
| SY0278 | X-Gluc | 100mg |
| QN1047 | pUC18载体 | 20ug |
| QN1063 | pEGFP-N3 哺乳动物细胞表达载体 | 20μl |
| MT0063 | DH10B感受态细胞 | 10×100μl |
| GL2121 | PolyLea非脂质体转染试剂 | 0.5ml|1ml|5×1ml |
| GL1187 | 氯化钙细菌感受态制备液 | 100ml |
| GL1191 | 转化储存液(2×TSS,pH6.5) | 100ml |
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文献和实验要怎么保存 zjubell 剪下来。TE融解,再就好跟感受态去做转化了。再挑单克隆,再培养多点,再提质粒鉴定。 这样就保种保好了。既有质粒,也有菌液。 zhangyuxianggx 谢谢!pcDNA3-mCherry也用同样的方法溶解下来吗?然后怎么保存?能否详细解释一下pcDNA3-mCherry是什么 nono1986 pcDNA3-mCherry意思是:带有mCherry(红色荧光蛋白
处理过的融合蛋白的2倍以上,这也说明标签的存在降低了该酶的活性。可以用固化了Cu2+的亲和层析柱去除切除的融合标签。 ■ 八种人趋化因子(Magis-trelli 2005)——所有的蛋白都在OrigamiTM B菌株中表达提高它们在胞质中的二硫键形成率。在趋化因子编码序列的C端引入了AviTMTag(亲和素)生物素化序列。切割后的细胞趋化因子可以用单体的亲和素树脂亲和层析与切割下的NusA标签和蛋白酶混合物分离开。所有切割纯化后的蛋白在细胞趋化实验中都显示了活性,而没有一个融合蛋白有这样的活性
:分别是增强型绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/单体红色荧光蛋白,具有不同的激发波长发射波长为,均由野生型荧光蛋白通过氨基酸突变和密码子优化而来。就eGFP而言,相对于GFP,其荧光强度更强、荧光性质更稳定。同时载体中构建的Kozak序列使得含有eGFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。mCherry是从DsRed演化来的性能最好的一个单体红色荧光蛋白,可以和GFP系列荧光蛋白共用,实现多色标记体内、外实验表明,mCherry在N端和C端融合外源蛋白时,荧光蛋白活性和被融合
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