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- 百奥莱博
- QN1083-HTO
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存：
440
- 英文名：
Band-Now Pre-Staining Protein Sample Treatment Buffer for SDS-PAGE
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
100μl|1ml|2ml
特别提示：包括荧光蛋白上样缓冲液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：荧光蛋白上样缓冲液
英文名称：Band-Now Pre-Staining Protein Sample Treatment Buffer for SDS-PAGE
产品货号：QN1083
产品规格：100μl|1ml|2ml
荧光蛋白上样缓冲液在电泳前的样品处理阶段对SDS-PAGE的蛋白样品进行预染，标记上荧光。实验完成以后，凝胶中或转膜后的蛋白条可直接通过紫外灯、LED灯或其他数字成像系统进行观察和分析，无需染色脱色。
荧光蛋白上样缓冲液灵敏度高比银染高。稳定性强，背景低。可对所有蛋白进行染色，不影响蛋白的迁移率与电泳图谱。电泳过程中，游离的染料分子与溴酚蓝的迁移速率一致，跑胶结束时 移至凝胶末端，背景干净。荧光蛋白上样缓冲液非常适合用于追踪蛋白表达纯化以及Western blot的SDS-PAGE。
使用步骤：
1. 请在使用前根据管壁标签上的体积加入resuspension buffer重悬。Resuspension buffer在4℃可能会有沉淀产生，室温下放置至沉淀消失。
2. 将用上样缓冲液处理的蛋白样品与待电泳蛋白样品1:2混合。比如，3ul上样缓冲液+6ul蛋白样品。
3. 90～100℃加热上述处理的样品混合液5分钟。细胞或组织样品，加热时间延长至10分钟。确保加热温度＞90℃使样品充分受热。
大部分预制胶(Bis-Tris体系除外)可以直接进行下一步。Bis-Tris体系的预制胶(如Life Technology)，需加入20%已处理样品体积的Enhancing buffer。比如，10ul已处理的样品需加入2ul Enhancing buffer。
4. 样品可以上样进行电泳了(无需再加Loading Buffer处理)。
5. 电泳结束后，将凝胶放至透射仪上进行观察和拍照。透射仪可以是紫外灯，蓝光LED灯或其它凝胶成像系统。如果光源在可见光波长范畴的无需剥胶，因为可见波长范围内的光可以穿透玻璃或塑料材质的胶板。
6. (可选的)如果有需要，经荧光蛋白上样缓冲液处理的凝胶仍可进行考染。按标准的考染步骤进行即可。
注意事项：
1. 请勿使用该上样缓冲液处理预染的或预处理的蛋白分子量标准。这些产品与荧光蛋白上样缓冲液不兼容。
2. 灵敏度影响因素：高pH(大于7)不会影响染色，低pH则会降低染色的效率，如果样品的pH低于5，建议将pH调整至7以上。
3. 荧光蛋白上样缓冲液不适合在如下SDS-PAGE实验中使用：切割蛋白条带用以测序、质谱分析或抗体制备。
4. 建议-20保存，如果室温放置2-3周，则可添加新的DTT，蛋白条带会重新变得清晰和明亮。添加DTT的终浓度不要超过20mM。也可以添加其他还原剂TCEP(2 mM)，效果也很好。
储存条件：-20℃
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文献和实验问：新买了GelRed，比较贵，打算用节约的方法来使用，也就是把GelRed预混在上样缓冲液里，和样品混合后上样电泳。因此想请教一下有经验的站友： 1 假定使用6X上样缓冲液，应该以多大比例混合GelRed？ 2 预混GelRed的上样缓冲液与核酸样品混合后，需要孵育一段时间还是可以直接上样？ 3 预混在上样缓冲液中的GelRed是否稳定，是否可以长期存放，以及存放条件是室温，4度
)，构象(例如超螺旋、开环或线性）以确保对迁移进行适当比较(了解更多: 结构和构象对样品迁移性的影响） 片段的数量和适当的分离形式，用于大小的估计 预期用途，如分子量标准是设计用于定性分析还是精确的定量测定 不同类型凝胶适用的分子量标准(例如，部分预制凝胶推荐设计特定分子量标准以获得最佳运行结果) 上样染料的性质，避免目的条带模糊(图 1) 上样缓冲液与使用凝胶的兼容性(例如，缓冲液的盐浓度会影响样品的迁移) 图 1. DNA 分子量标准差异。 分子量标准 #2 由色谱纯化的 DNA 片段组成，存在
以优化其 mRNA 结构，增加翻译效率 4、AAV（带荧光标记）体内感染后检测不到荧光或者荧光弱，可能是什么原因？ 可能的原因 解决方案 病毒滴度过低 重新测定病毒滴度 病毒失效 病毒颗粒在生产、保存或运输过程中可能受损，导致感染效率低或完全失效 检查病毒滴度；体外测试病毒的感染效果；重新包装病毒 对目标组织/细胞的感染效率低 选择组织/细胞特异性 AAV 血清型 荧光蛋白表达的问题 启动子选择不当：如果用于驱动荧光蛋白
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