请教GelRed预染上样缓冲液的方法

互联网2013-08-19

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问：新买了GelRed，比较贵，打算用节约的方法来使用，也就是把GelRed预混在上样缓冲液里，和样品混合后上样电泳。因此想请教一下有经验的站友：
1 假定使用6X上样缓冲液，应该以多大比例混合GelRed？
2 预混GelRed的上样缓冲液与核酸样品混合后，需要孵育一段时间还是可以直接上样？
3 预混在上样缓冲液中的GelRed是否稳定，是否可以长期存放，以及存放条件是室温，4度还是-20？
4 GelRed效果有比EB好吗？
多谢！

答：1.GelRed 买来一般都是10000X的，根据你要配制上样缓冲液的量来调整加入gelRed 的量,既稀释到6X。（一般LoadingBuffer就用溴酚蓝加GelRed就行了）
2.一般采用涡旋混匀，混匀充分后就可以使用。
3.GelRed 很稳定的，不过一般使用后4度保存
4.GelRed 比EB效果略次一点，不过理论上比EB安全很多，但是，GelRed会在很大程度上影响连接与转化效果。
GelRed 如果加在loading buffer里会影响条带迁移率也就是说电泳图的条带大小是错的我们实验室用GelRed都是后染的，跑完胶再用1XGelRed泡