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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
314
- 英文名:
GelHong Red nucleic acid gel dye
- 保质期:
3年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
500μl
特别提示:包括GelHong红色核酸凝胶染料在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:GelHong红色核酸凝胶染料
英文名称:GelHong Red nucleic acid gel dye
产品货号:RFT153
产品规格:500μl
本品是一种可以替代溴化乙锭(EB)的红色荧光核酸染色剂。与SYBR或EB相比,本红色核酸染料最显著的特性是其在多种条件下的高灵敏性和稳定性。另外相对EB或SYBR,GelHong诱导突变的能力极低。
使用方法:
注意:染料使用前应在室温下彻底融化混匀后使用。
1、GelHong预染方法
1.1、将GelHong试剂按1:10000溶于琼脂糖凝胶溶液中,充分混匀。(例如:将5μl GelHong 试剂加入到50ml 凝胶溶液中)。注:由于GelHong 具有出色的热稳定性,可将试剂直接加入高温的凝胶溶液中,而不用等凝胶溶液冷却后再加入。
1.2、浇制凝胶并使其凝固后上样电泳。
注意:使用这种预先加入染色剂的琼脂糖凝胶,每次不易加入太多的 DNA 样品,否则容易造成饱和现象,可以做多个不同浓度的 DNA Marker,以确定最佳 DNA 上样量。
1.3、紫外下观察结果。
注:如果始终出现拖尾或是条带无法分离的现象,您可以使用后染法对DNA染色,以确认问题是否与染色剂有关。如果使用后染法问题依旧存在,则说明问题与染色剂无关,请尝试减少核酸的上样量后进行电泳。
2、GelHong后染方法
2.1、用H2O将GelHong稀释约3,300倍到0.1M Nacl中,制成3X染色溶液。(例如:将15μl GelHong和5ml的1M NaCl加入到45ml H2O中)。注:GelHong 1X染色溶液同样可用于后染,但其灵敏度要低于3X染色溶液。
2.2、将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚*烯容器中。缓慢加入足量的3X染色溶液浸没凝胶。
2.3、在室温下轻轻地摇动凝胶板,最佳的染胶时间为30 分钟,这取决于凝胶板的厚度、琼脂糖或聚*烯酰胺的浓度和 DNA 的长短。凝胶越厚或琼脂糖的浓度越高,染色所需要的时间就越长。注:染色溶液至少可重复使用2-3次。如果不是立即再用的话,建议将用过的染色溶液冷藏保存。
2.4、紫外下观察结果。
储存条件:4℃避光,有效期3年。
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文献和实验凝胶电泳是我们最基本的分子实验。其基本原理是电泳分子在电场作用下移动,因此它同电场的强度、电泳分子本身所带的净电荷数成正比。由于在电泳中使用了无反应活性的稳定的支持介质,从而降低了对流运动,故电泳的迁移率又同分子的摩擦系数成反比的。目前实验室中最常用的琼脂糖凝胶电泳染料有EB、GeneFinderTM、GoldViewTM、SybrGreenI、GelRed和GelGreen。下面对这几种核酸染料一一进行分析。1.EB溴化乙锭(EB)由于其价格便宜、使用方便已成为最常用的核酸染料,被广泛
5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液 成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量 445 mmol/L Tris碱 445 mmol/L 硼酸盐 10 mmol/L EDTA 水 54g 27.5g 硼酸 20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0) 补足1L 染料 1%溴酚蓝(bromophenol
于上佳的上样缓冲液中,可产生相等或预期强度的条带,并且不含有条带污点,无染色阴影。与此相反,分子量标准 #1 采用较老技术制造,并存在于次优组分的缓冲液中。 b. 样品和标准品准备 须计算上样到凝胶中的 DNA 量,以确保目的条带良好分离,并用于可视化和检测。虽然用荧光染料足以检测 1 - 100 ng/条带的 DNA,但最小可检测量取决于 所用染料(了解更多: 核酸染色特性)[2]。注意,样品或标准品的超载会造成条带污点并遮盖附近条带,从而导致条带分辨不清,特别是片段大小相似时(图 2A)。 图
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