产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
MolPure® Gel Extraction Kit DNA凝胶回收试剂盒(琼脂糖凝胶) |
19101ES08 |
5 T |
询价 |
19101ES50 |
50 T |
263.00 |
19101ES70 |
200 T |
573.00 |
产品描述
MolPure® Gel Extraction Kit采用MolPure® DNA Column G1和高效的溶胶体系,适用于从TAE或TBE琼脂糖凝胶中回收长度为100 bp-40 kb的高质量DNA片段。回收过程中不需要用到有毒的酚、氯仿等有机物抽提,也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。操作简便,溶胶时间短,加入溶胶液体积小,20 min即可完成整个纯化过程。试剂盒内的MolPure® DNA Column G1可选择性吸附高达8 μg的DNA片段,不吸附酶、矿物油和其它杂质,得到的DNA纯度高,可直接用于后续酶切、连接、转化、测序和文库构建等实验。
产品组分
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
19101ES08 (5 T) |
19101ES50 (50 T) |
19101ES70 (200 T) |
19101-A |
DNA吸附柱 (MolPure® DNA Column G1) |
5 个 |
50 个 |
200 个 |
19101-B |
2 mL收集管 (2 mL Collection Tube G1) |
5 个 |
50 个 |
200 个 |
19101-C |
缓冲液AC (AC Buffer G1) |
0.5 mL |
5 mL |
20 mL |
19101-D |
溶胶液BD (BD Buffer G1) |
2 mL |
20 mL |
80 mL |
19101-E |
漂洗液W* (Wash Buffer*) |
1.3 mL |
13 mL |
52 mL |
19101-F |
洗脱液 (Elution Buffer) |
1 mL |
10 mL |
20 mL |
运输和保存方法
常温运输,常温保存。产品有效期12个月。
注意事项
1. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
2. 注意观察各溶液是否有析出或浑浊(尤其冬季等室温为低温环境时),可37℃温浴复溶至溶液澄清,避免影响使用效果。
3. 溶胶液BD中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。且应注意避免强光直射。
4. PCR扩增产物和酶切产物等反应体系的纯化,建议使用MolPure® PCR Purification Kit(Cat#19106)。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
6. 本产品仅作科研用途!
实验前准备
1. 自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,无水乙醇,离心管等。
2. 除特殊指明外,所有的离心步骤均在室温完成,使用可以达到13,000 rpm转速的传统台式离心机。
3. 首次使用前,在漂洗液W*(19101-E)瓶中加入4倍体积的无水乙醇,充分混匀后使用,并做好标记。如果发现漂洗液W*由于运输或保管不当造成容量严重不准,请用量筒定容后再加入4倍体积的无水乙醇。每次使用后将瓶盖盖紧,以保持漂洗液W*中的乙醇含量。
操作方法
一、样本预处理:
1. 称重含有目的片段的琼脂糖凝胶。
2. 每100 mg 1% 琼脂糖加入100 µL溶胶液BD。
【注】:对于高浓度的琼脂糖凝胶,溶胶液BD加入量需等比例增加。
3. 50~60℃水浴10 min。期间每2-3 min轻微颠倒混匀,直至胶块完全融化。
【注】:对于400 bp以下片段,建议加入0.3倍体积的异丙醇,可显著提高回收率。
二、DNA产物纯化:
1.(选做)向DNA吸附柱G1中加入100 µL缓冲液AC,13,000 rpm离心1 min,弃掉废液。
【注】:仅限临近效期3个月内的产品进行此项操作,常规产品选做此项操作。
【注】:处理后的DNA吸附柱G1仅限当天使用。
2. 将样本混合液加入到DNA吸附柱G1中,室温放置1 min,12,000 rpm离心1 min,弃掉废液。
【注】:混合液每次最大加入体积750 µL,可分多次离心。
3. 将DNA吸附柱G1放回收集管,加入700 µL漂洗液W*,12,000 rpm室温离心30 s,弃废液。
【注】:确保漂洗液W*已添加无水乙醇。
4. 加入500 µL漂洗液W*,12,000 rpm室温离心30 s,弃废液。
5 将DNA吸附柱G1放回收集管,空柱12,000 rpm室温离心2 min,室温晾干5 min。以除去残留的漂洗液W*。
6. 将DNA吸附柱G1放入新的离心管(自备)中,在DNA吸附柱G1中央加入50 µL洗脱液,室温放置2 min。然后12,000 rpm离心1min。收集滤液,即为DNA溶液。
【注】:可通过以下方式提高回收产量:①70℃预热洗脱液;②将DNA滤液再次上柱,室温放置2 min后,洗脱。
7. DNA溶液可置于-20℃长期保存。
HB220216