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- KL-ZL-7501
- 2025年09月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负80度
- 保质期：
3年
- 英文名：
pFW5链霉菌质粒
- 库存：
100
- 供应商：
上海柯雷生物
- 规格：
20ul
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文献和实验1、将适量的菌体悬浮于500μl溶菌酶溶液（2%）中，37℃温育1hr 左右至完全溶菌，2、加入500μl碱性SDS溶液（0.3mol/L NaOH, 2%SDS），立即振荡混合完全，3、打开管盖，在70℃放置15min（对大于20kb的质粒则最好放在55℃， 30min），然后于水浴中冷却至室温，4、加入100μl酸性苯酚/氯仿溶液，用混合器振荡至液体彻底混合均匀，12000rpm离心5min,移取上清液，弃去白色中间层。5、用中性苯酚/氯仿重复抽提直至看不见（或非常少）中间
原理 加利利链霉菌ATCC31671产生2-羟基阿克拉菌酮（2-hydroxyaklavinone）。将含有聚酮体酮基还原酶（polyketide ketoreductase，PKR）的质粒pWX03转入加利利链霉菌ATCC31671，可以产生阿克拉菌酮（aklavinone）。 第一部分 链霉菌质粒DNA提取 实验材料和试剂 菌种：质粒pWX03（含PKR）/变铅青链霉菌（S. lividans
1实验原理 DNA重组分子在体外构建完成后，必须导入特定的受体细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组DNA分子的转化。对于不同的受体细胞，往往采取不同的转化战略。1.1 DNA重组分子的常用转化方法 1.1.1 Ca 2 诱导转化1970年Mandel和Higa发现用CaCl2处理过的大肠杆菌能够吸收l噬菌体DNA，此后不久，Cohen等人用此法实现了质粒DNA转化大肠杆菌的感受态细胞，其整个操作程序为：1）将处于对数生长期的细菌置入0℃
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