SURE化学感受态细胞

特别提示：包括SURE化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：SURE化学感受态细胞
英文名称：SURE Chemically Competent Cell
产品货号：MQ0016
产品规格：10×100μl/50×100μl

真核生物DNA存在较多“十字型”、“Z 字型”等二级或三级结构，这种DNA结构在利用传统大肠杆菌进行克隆时易被大肠杆菌体内的重组酶系统或其他防御系统识别并对其进行重组，删除等破坏，导致很难对这类DNA进行正确的克隆操作。
SURE菌株可以解决这些问题：此菌株体内重组酶系统整条通路被破坏，并且(McrA-，McrCB-,McrF-，Mrr-，HsdR-)这些限制性突变的存在赋予此菌株无法对外源DNA进行标记、限制的能力，提高了外源甲基化DNA的克隆效率，同时具有核酸酶(endA)突变、重组酶(recB recJ)突变，增强了外源DNA的稳定性。
存在于F´因子上的lacIqZΔM15基因使此菌株可以进行蓝白斑筛选；Kanr，Tetr赋予菌株卡那霉素和四环素抗性。SURE感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达5×108cfu/μg。
保存条件：-80℃
基因型：
E.coli B e14-(McrA-)Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)171 endA1 gyrA96 thi-1 supE44 relA1 lac recB recJ sbcC umuC::Tn5(Kanr)uvrC [F´ proAB lacIqZΔM15 Tn10(Tetr)].
操作说明：
1.SURE感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中)，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项：
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.此菌株具有卡那霉素，四环素抗性，拥有这两种抗性的质粒无法使用；对<40 µg/ml氯霉素有抗性，但对100 µg/ml氯霉素敏感。使用其他抗生素参考浓度：氨苄青霉素(终浓度：100 µg/ml)，氯霉素(终浓度：100 µg/ml)。
5.SURE感受态细胞采用常规转化方法，转化效率可达5×108cfu/μg。

除了SURE化学感受态细胞,，我公司还供应以下相关产品：



名称：单细胞悬浮液
货号：BTN130805
规格：1mL
本产品是单细胞悬浮溶液，本产品与后续各种单细胞分析实验、单细胞扩增实验兼容。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

名称：即用型蓝白T载体E型(无RNA启动子，无MCS)
货号：BTN120515
规格：20次
本产品是用Xcm I酶切线性化的DNA片段，其两个末端的5′都有一个突出的T，可以用于快速克隆具有加尾活性的耐热酶(如Taq DNA聚合酶)扩增得到的PCR片段。

产品特点：
1. 由于是通过酶切制备，所以载体两端的带T率为100%，远高于用Taq DNA聚合酶和TdT末端转移酶在平末端载体加尾得到的T载体。
2. 克隆的阳性率一般在90%以上，缩短了筛选过程。
3. 来源于pUC19 ，无RNA聚合酶启动子，插入位点两侧无多克隆位点。
4.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
5. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α 肽编码区内，可以进行蓝白斑筛选。
6.含有丝状噬菌体f1 复制起始子，可以制备单链DNA。

产品组成：

组分	规格
即用型蓝白T载体E型(10ng/μL)	60μl
阳性对照(35ng/μl)	30μl

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

质粒图谱


名称：羧苄青霉素钠溶液
货号：BTN120683
规格：1mL
本产品是浓度为50mg/mL的羧苄青霉素钠溶液，澄清透明，pH值在6.0-8.0之间。羧苄青霉素钠(羧苄青霉素二钠盐；羧苄青霉素钠；羧苄青；卡比西林)，分子式：C17H16N2O6SNa2，分子量：422.37，CAS号：4800-94-6。溶于水和乙醇。抗菌谱包括革兰氏阴性和阳性细菌、假单胞菌属等，可用于配制细胞培养基。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

名称：pGL6-TA报告基因质粒
货号：YT443
规格：1μg
pGL6-TA报告基因质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进，一方面对于luciferase的编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达，同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理，在保持原有功能不变的情况下，使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。


pGL6-TA主要用于在其多克隆位点插入特定的启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。pGL6-TA和pGL6相比在多克隆位点和luc基因之间加入了一段minimal TA promoter，使luc基因的基础转录水平提高。

pGL6-TA质粒的主要信息如下：

Base pairs	5629
Multiple cloning region	1-59
Minimal TA promoter (pTA)	66-88
luc2 reporter gene	120-1782
SV40 late poly(A) signal	1817-2038
SV40 early enhancer/promoter	2086-2504
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region	2529-3323
Synthetic poly(A) signal	3348-3396
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region	3463-3482
ColE1-derived plasmid replication origin	3720
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region	4511-5371
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	5476-5629
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region	5578-5597

pGL6-TA质粒的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 用于插入调控序列：在多克隆位点选取适当的酶切位点，经酶切处理后连入适当的基因转录调控序列。pGL6-TA也可以用作报告基因检测时的阴性对照。
3. pGL6-TA质粒以及以此质粒为模板构建的质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒（YT273）。

储存条件：-20℃。