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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
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100U/500U/1000U/10KU
特别提示:包括重组肠激酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:重组肠激酶
产品货号:MQ0075
产品规格:100U/500U/1000U/10KU
CAS: 9017-74-8
EC: 3.4.21.9
储存温度:-20℃或以下
来源:重组牛肠激酶,大肠杆菌表达
蛋白序列:氨基酸序列与牛肠激酶轻链一致。
1.产品简介
重组牛肠激酶是一种高纯度的重组牛肠激酶轻链片段。该酶经HPLC纯化,纯度高,特异性高,不含其他蛋白酶。肠激酶可以切割含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端肽键:天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸(DDDDK)。可以在较宽pH范围(4.5-9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签。
2.产品特性
来源:重组大肠杆菌
外观:澄清、无色至淡黄色液体
活性 ≥ 5.0 U/µl
纯度(蛋白电泳)单一主条带
电泳(分子量)25.8 ±2.6kDa单位定义:1U定义为在25℃,12h~16h之内,将0.5mg保存于25mM Tris-HCl 8.0 缓冲液中的融合蛋白切割95%所需的酶量。
3.推荐使用方法
1)25℃酶切条件:
按照酶活性定义,酶切条件举例:
25mM Tris-HCl 8.0体系中:
融合蛋白 0.1-1mg/ml(蛋白总量50-100µg)
重组EK 0.1-0.2U
25℃过夜酶切,或完全酶切需16-24h,用SDS-PAGE
检测酶切效果。
2)4℃低温酶切条件:
4℃能对底物进行有效酶切,但需要将酶切时间延长至48-64h,或增加2-3倍酶量。
3)酶切优化和放大
优化:可以对酶切条件进行优化,例如缓冲液pH,融合蛋白浓度,EK的量,以及酶切时间,使融合蛋白能在稳定条件下被酶切,用SDS-PAGE检测酶切效果。
放大:选择优化后的反应条件,按该条件等比例放大,用SDS-PAGE检测酶切效果。
4)去除重组肠激酶的方法:使用胰蛋白酶抑制剂亲和层析(例如sigma T0637)去除重组肠激酶。
5)注意:不建议37℃条件下酶切,可能会有非特异性酶切出现。
4.常见影响肠激酶活性的因素
在>200mM 咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果受影响。可参照以下推荐方法进行酶切:
1)为获得理想酶切结果,请将样品透析到25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中,再进行酶切。
2)若不便透析,可将样品稀释,咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶切,酶的用量与蛋白的比例不变(即1U酶切500µg蛋白)。
3)如果样品溶液中含有上述成分中的一种或多种,且不便去除,此时适当增加酶量或延长酶切时间,也可达到较好酶切效果。
5.储存和运输稳定性
酶液储存稳定性:-20℃,24个月稳定;25℃,一周内,无活性损失。缓冲体系:50mM Tris-HCl,pH8.0,250mM NaCl,2mMCa2+,50%甘油。
酶液反复冻融稳定性:反复冻融5次,无活性损失。
运输稳定性:蓝冰保温运输,稳定。
6.产品优势
特异性:特定的蛋白酶,切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸(DDDDK)。
纯度高:不含其他蛋白酶,无非特异性切割。
无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。
符合法规要求:生产设备和生产环境符合相关法规要求,生产过程完全遵循NSF ISO 9001:2008质量体系并符合GMP指导原则。
质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。
除了重组肠激酶,,我公司还供应以下相关产品:
名称:重组人白介素IL-1β(白细胞介素1β)
货号:JN0386
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的大肠杆菌表达系统制备,目的基因编码的Ala117-Ser269表达纯化而来。
IL-1B质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)。
IL-1B制剂:冻干品
IL-1B保存:
冻干蛋白可在-20℃长期保存,室温也可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4~7℃保存2~7天。
复溶后建议分装冻存在-20℃,可保存3个月,应避免反复冻融。
IL-1B复溶:
1、试剂开盖前请先离心。
2、复溶浓度应大于100 μg/ml.
3、冻干蛋白溶于ddH2O中
4、复溶后根据使用量分装保存,避免反复冻融。
关于IL-1B:
IL1B belongs to the IL-1 family. Interleukin 1 (IL-1) is a family of polypeptide cytokines consisting of two agonists, IL-1 alpha (IL-1F1) and IL-1 beta (IL-1F2) encoded by two distinct genes and perform identical biological functions. IL-1 stimulates thymocyte proliferation by inducing IL-2 release, B-cell maturation and proliferation, and fibroblast growth factor activity. IL-1 proteins are involved in the inflammatory response. It is identified as endogenous pyrogens, and is reported to stimulate the release of prostaglandin and collagenase from synovial cells.
名称:重组人N-乙酰氨基葡糖-6-硫酸酯酶
货号:JN0530
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的哺乳动物细胞表达系统制备而成,目的基因编码的Val37-Leu552在C端含有His标签。
N-Acetylglucosamine-6-Sulfatase质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)
N-Acetylglucosamine-6-Sulfatase制剂:液体
N-Acetylglucosamine-6-Sulfatase保存:收到货后请置于-20℃,可保存6个月,避免反复冻融。
关于N-Acetylglucosamine-6-Sulfatase:
N-Acetylglucosamine-6-Sulfatase is a member of the Sulfatase family. N-Acetylglucosamine-6-Sulfatase is required for the lysosomal degradation of the Glycosaminoglycans (GAG) Heparan Sulfate and Keratan Sulfate. N-Acetylglucosamine-6-Sulfatase hydrolyzes the 6-Sulfate groups of the N-Acetyl-D-Glucosamine 6-Sulfate units of Heparan Sulfate and Keratan Sulfate. N-Acetylglucosamine-6-Sulfatase binds 1 Calcium ion per subunit. N-Acetylglucosamine-6-Sulfatase deficiency are the cause of Mucopolysaccharidosis Type 3D (MPS3D), an inborn error leading to lysosomal accumulation of heparan sulfate. MPS3D has profound mental deterioration, hyperactivity, and relatively mild somatic manifestations.
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