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- ATCC
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- 中国/美国
- 2025年08月21日
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100
- 细胞类型：
科研
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- 组织来源：
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- 物种来源：
鼠/人/其它
- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源：
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- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 年限：
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- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 英文名：
FDC-P1
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ATCC货号：小鼠骨髓细胞_FDC-P1
1. 液体培养基的保存是冷藏好？还是冷冻好？
要冷藏！！因为液体培养基经冷冻后再经溶化时，其溶液的pH值会发生改变，溶液往往变碱，某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中，通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。
2.液体培养基中谷氨酰胺的作用，及使用方法。
几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求，细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置-20 ◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支）。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培养基中，其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色，-24◦C保存。
3. 培养用液pH对细胞生长的影响
由于，大多数细胞适宜pH为7.2~7.4，偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不完全相同，原代培养细胞一般对pH变动耐受差，无限细胞系耐受力强。
但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些，偏酸环境中更利于细胞生长。因此，我们在配制培养用液时，可把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时，溶液的pH还会向上浮动0.2左右。
4.细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗？
不见得！因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下，pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力最强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶，以便于将含血清的培养基冲洗干净，这样就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液浓度为：
（1）０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；
（2）０.２５％胰蛋白酶＋０.０３％ＥＤＴＡ。
（3）0.25% 胰蛋白酶
溶液ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配制。
多数细胞传代消化可使用０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ这种消化液。
购买上海烜雅生物细胞注意事项（烜雅生物）发布
一、客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；
收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
二、如为贴壁细胞，请在显微镜下观察细胞密度：
1. 未超过80%汇合度时，用75%酒精（建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水，喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作；然后打开盖子，先用枪头把培养基吸出10ml左右，放在离心管里，然后瓶口过火（严禁直接倾倒），这样可以保证不污染，再用10ml的移液管，将剩余的培液全部吸出，放于离心管中，培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整）之后，传代或者冻存。
2. 超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下：
1) 弃去培养液，用3ml PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次；
2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来；
3) 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中，按要求分瓶。
三、如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心5分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
注意：换液时一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。
四、售后服务政策
细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果；细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，我们调查核实后予免费调换，不收取任何费用。
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文献和实验小鼠骨髓单细胞悬液制备流程 颈椎脱臼法处死小鼠，放在75%酒精中浸泡5 min。提前于超净台上准备一个消毒托盘（可用无菌口罩或者用浸满酒精的纱布代替），取出小鼠并铺于消毒托盘上。 在无菌环境下取小鼠的后肢骨。用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开，并分离两下肢的皮肤。将皮肤往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，游离出小鼠的两条后肢。 小心剥离肌肉（肌肉两端的白色坚韧组织为肌腱，可以顺着肌腱分离，肌肉主要靠肌腱与关节相连），分别剪下Femurs（股骨）和Tibias（胫骨
微核试验是用于染色体损伤和干扰细胞有丝分裂的化学毒物的快速检测方法。微核是指存在于细胞中主核之外的一种颗粒，大小相当于细胞直径的1/20～1/5，呈圆形或杏仁状，其染色与细胞核一致，在间期细胞中可以出现一个或多个。一般认为微核是细胞内染色体断裂或纺锤丝受影响而在细胞有丝分裂后期滞留在细胞核外的遗传物质。所以，微核试验能检测化学毒物或物理因素诱导产生的染色体完整性改变和染色体分离改变这两种遗传学终点。微核可以出现在多种细胞中，但在有核细胞中较难与正常核的分叶及核突出物相区别。由于红细胞在成熟之前
啊；性别方面公母不限，经典版本说公的好，公的壮实，骨头大）。 2. 冲骨髓细胞，我冲出来的骨髓细胞永远没有文献上说的那样多，但不影响大局，我一次用两只，怕出意外少了细胞，论坛里有战友说不要混一起，我不知道具体原因，盼赐教。 3. 细胞计数，不去红细胞！（不知是好是坏，文献说去红细胞会把一些祖细胞也去掉了）记数，计数只记白细胞（形态学区分，红细胞无核较小，目前我的眼睛目前还在为此积累经验），2×10e6（似乎太低，这套方案作者是一皿养到第12天的，所以我个人觉得看你在哪天收细胞做下游实验
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