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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 库存:
大量
- 生长状态:
贴壁生长
- 运输方式:
干冰
- 英文名:
(FDC-P1细胞)
- 规格:
详见说明书
培养条件
DMEM-H10%FBS
细胞生长:悬浮生长
细胞形态:淋巴母细胞样单个或成簇生长
细胞数量:1×106个细胞数
细胞传代:1:3传代3~4天1次
细胞特性:该细胞是从在WEHI-3细胞条件化培养基中长期培养的DBA/2小鼠正常骨髓细胞建立的细胞的持续生长依赖于WEHI-3细胞的条件化培养基。该细胞表达Thy-1.2(24%)
细胞纯度:98%
细胞活力:87%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞冻存:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1Vial)或活细胞运输(T-25flasks)
细胞用途:只可用于科研不可用于临床诊断和治疗
(FDC-P1细胞)小鼠骨髓细胞处理程序
在培养瓶中接种细胞并在培养基中完全填充培养基以防止运输过程中细胞的丢失。
1、收到后,目视检查培养物是否有微生物污染的宏观证据。
使用倒置显微镜(配备有相位传感器),仔细检查是否有微生物污染的证据。还检查以确定大多数细胞是否仍然附着在烧瓶底部?在运输过程中,培养物有时被粗略地处理,并且许多细胞经常分离并悬浮在培养基中(但仍然是可行的)。
2、如果细胞仍然附着,无菌去除5至10毫升的运输介质。可以节省运输媒介以重复使用。在5%℃的空气中,在37℃下培养细胞,直到它们准备进行传代培养BGC-823人胃腺癌细胞(低分化)没有附着,无菌地移除烧瓶的全部内容物,并以1000rpm离心5至10分钟。取出运输介质并保存。在10毫升这种培养基中重新沉淀颗粒细胞并加入25厘米的烧瓶中。在空气中5%℃下,在37℃下孵育,直至细胞准备进行传代培养。
(FDC-P1细胞)小鼠骨髓细胞冷冻保存程序
1、去除和丢弃培养基。
2、简要冲洗细胞层0.25(w/v)trypsin0.53mm EDTA溶液去除所有痕迹血清含有胰蛋白酶抑制剂。
3、加入2至3毫升的胰蛋白酶-EDTA溶液瓶中,倒置显微镜下观察细胞到细胞层是分散的(通常在1到10分钟)。
注意:为了避免结块,不要在击打或摇晃瓶子时搅拌细胞,等待细胞分离。难以分离的细胞可以放置在37°C以促进扩散。
4、加入6~8毫升的完整生长培养基,轻轻吸液,抽吸细胞。
5、去除胰酶EDTA溶液,将细胞悬液到离心管和旋转约5 1000rpmfor 10分钟。
6、低温保存培养液中的上清液和复苏细胞。
7、将细胞转移至低温瓶,1ml/瓶。
8、低温容器中的细胞Frozen(NalgENα5100-01)。
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文献和实验小鼠骨髓单细胞悬液制备流程 颈椎脱臼法处死小鼠,放在75%酒精中浸泡5 min。提前于超净台上准备一个消毒托盘(可用无菌口罩或者用浸满酒精的纱布代替),取出小鼠并铺于消毒托盘上。 在无菌环境下取小鼠的后肢骨。用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤,用眼科剪小心剪开,并分离两下肢的皮肤。将皮肤往下在脚踝处剪断,往上在髋关节处剪断,游离出小鼠的两条后肢。 小心剥离肌肉(肌肉两端的白色坚韧组织为肌腱,可以顺着肌腱分离,肌肉主要靠肌腱与关节相连),分别剪下Femurs(股骨)和Tibias(胫骨
微核试验是用于染色体损伤和干扰细胞有丝分裂的化学毒物的快速检测方法。微核是指存在于细胞中主核之外的一种颗粒,大小相当于细胞直径的1/20~1/5,呈圆形或杏仁状,其染色与细胞核一致,在间期细胞中可以出现一个或多个。一般认为微核是细胞内染色体断裂或纺锤丝受影响而在细胞有丝分裂后期滞留在细胞核外的遗传物质。所以,微核试验能检测化学毒物或物理因素诱导产生的染色体完整性改变和染色体分离改变这两种遗传学终点。微核可以出现在多种细胞中,但在有核细胞中较难与正常核的分叶及核突出物相区别。由于红细胞在成熟之前
啊;性别方面公母不限,经典版本说公的好,公的壮实,骨头大)。 2. 冲骨髓细胞,我冲出来的骨髓细胞永远没有文献上说的那样多,但不影响大局,我一次用两只,怕出意外少了细胞,论坛里有战友说不要混一起,我不知道具体原因,盼赐教。 3. 细胞计数,不去红细胞!(不知是好是坏,文献说去红细胞会把一些祖细胞也去掉了)记数,计数只记白细胞(形态学区分,红细胞无核较小,目前我的眼睛目前还在为此积累经验),2×10e6(似乎太低,这套方案作者是一皿养到第12天的,所以我个人觉得看你在哪天收细胞做下游实验
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