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- invitrogen
- 15224041
- 美国
- 2025年07月12日
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嵘崴达
- 英文名：
T4 DNA 连接酶 (5 U/µL)
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250 units
T4 DNA 连接酶 (5 U/µL)
货号: 15224041
产品概述
T4 DNA 连接酶利用 ATP 的能量在双链 DNA 之间催化 3´ 羟基端和 5´ 磷酸端形成磷酸二酯键。这种独特的 T4 DNA 连接酶缓冲液优化了连接反应，使其在 5 分钟内即可完成 (1)。单链核酸不是这种酶的底物。提供 T4 DNA 连接酶技术公告。
应用：克隆（平末端或粘性末端连接）(2)。向平末端 DNA 添加连接子或接头 (2)。
来源：从大肠杆菌œ溶素原 NM989 纯化而来。
性能和质量检测：脱氧核糖核酸内切酶、3´ 和 5´ 脱氧核糖核酸外切酶分析；经过连接效率检测。
单位定义：一个单位的酶量可于 37°C 下在 20 min 内催化 1 nmol 32P 标记的焦磷酸盐转化成 ATP。（一个单位相当于约 300 个粘性末端连接单位。）
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Roche试剂，部分常用现货，周三定货，2-3周到货。
GE试剂，耗材，部分常用现货，周二，周五定货，3周左右。
SIGMA试剂，周一，五定货，3周左右到货。
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
核苷酸激酶缓冲液中进行。 质量保证： 无核酸内、外切酶污染。每批T4 DNA连接酶均通过模拟克隆实验进行检测，该实验可以检测出待连接DNA末端的任何破坏。结果表明>99.9%的DNA末端未受任何降解。 单位定义(粘性末端活性单位）：在20µl连接反应体系、0.12µM (300µg/ml)的5'-末端浓度条件下，16°C反应30分钟，能使50% 的经Hind Ⅲ消化的λDNA片段连接所需的酶量定义为一个NEB单位。 一个粘端连接活性单位=0.015个韦氏（ATP-PP交换）单位
噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60KD，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。 DNA连接酶 - DNA连接酶种类 T4DNA连接酶
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