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DNA连接酶

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  • 2025年10月31日
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    • 英文名

      DNA Ligase, T4

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      嵘崴达

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    • 规格

      500 UNITS

    T4 DNA 连接酶

    solution, from Escherichia coli(NM 989), suitable for activity assay

    别名:
    dna 连接酶,t4

    一般描述

    T4 DNA 连接酶催化双链DNA中邻近的3′-羟基-和5′-磷酸末端之间磷酸二酯键的形成。双链DNA中单链切口也被T4 DNA连接酶封闭。

    成分
    T4 DNA连接酶,包括含有ATP的10倍浓缩连接缓冲液。

    特异性

    热灭活:可以通过加热使酶失活(65℃,10分钟)。

    应用

    连接粘性和平端DNA 片段。

    质量

    质量

    根据现行质量控制程序,测试不存在脱氧核糖核酸酶和核酸外切酶。

    单位定义

    一个单位的T4 DNA 连接酶是在+ 37°C下在20分钟内将 1 nmol 32P 从焦磷酸盐转化为诺芮特可吸收材料的酶活性量。一个单位对应于在核酸外切酶III抗性测定中测定的0.2U。稀释缓冲液:50 mM Tris-HCl,10 mM 二硫赤藓糖醇,牛血清白蛋白,500 μg/ml,pH 7.6(+ 25°C)。

    10716359001 DNA Ligase, T4, 500 units (1U/DNA连接酶 500 U (1 U/µl)
    10799009001 DNA Ligase, T4, 500 units (5U/ DNA连接酶 500 U (5 U/µl)
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    相关实验
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      。 由此题我发现,目的基因由两种限制酶切割,一端由EcoRI切出黏性末端,另一端由AluI切出平末端;载体质粒由两种限制酶切开,一端由EcoRI切出黏性末端,另一端由SmaI切出平末端。在构成重组 质粒时,两个黏性末端碱基互补,由DNA连接酶可以连接上磷酸二酯键,这没有疑议。但是另一端两个平末端也能由DNA连接酶连接上,并且原题中第(3)问“图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求? 。”答案为“否”。 也就是由此题我们可以得出一个结论:DNA连接

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