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UE PCR清洁试剂盒

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  • UE
  • UE-PCR-50
  • 2025年11月08日
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      UE PCR清洁试剂盒

    • CAS号

      UE-PCR-50

    • 供应商

      UE PCR清洁试剂盒

    • 规格

      250T

    UE PCR清洁试剂盒
    产品概述:
    储存条件
    Buffer PCR-A:DNA结合溶液。室温密闭贮存。
    Buffer W2 concentrate:去盐液。使用前,按试剂瓶上的指定体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%无水乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
    Eluent: 洗脱液,室温密闭贮存。



    流程图


    常见问题解答:

    得率低或者得不到DNA
    ·Buffer W2中没有加入乙醇
    Buffer W2在使用之前必需加入100%或者95%的乙醇。
    ·不合适的洗脱液
    DNA只能在低盐和pH7.0的条件下有效的洗脱。应使用试剂盒提供的洗脱液或者用水(pH7.0)洗脱。在65℃下预热洗脱液可以提高洗脱效率。
    ·洗脱液体积不够或者没有浸润膜
    洗脱液应加在制备膜的中央以确保其均匀的浸润整个膜。
    ·采用不合适的负压装置
    确保负压保持在 -25至-30英尺汞柱。

    DNA不能很好地用于下游实验
    ·洗脱时盐浓度过高
    确保在洗脱之前盐分都被洗涤去除。正确使用Buffer W1,避免在管体上残留。
    ·样品上样电泳时样品跑出胶孔
    洗脱液中残留有乙醇(样品会飘在琼脂糖凝胶孔中)
    仔细的操作说明书中的所有步骤以去除残留的乙醇。
    ·洗脱液中含有引物二聚体
    引物二聚体会影响后续的反应,如测序。任何大于40bp的引物二聚体都将不会被完全去除。结合完后,用750ul盐酸胍(35g盐酸胍溶于100ml去离子水)洗涤UE PCR清洁制备管或者制备板,然后再接着进行说明书中所述的洗涤洗脱步骤。
    ·洗脱液中含有变性的单链DNA,这在凝胶电泳中可见一条又小又淡又糊的条带
    洗脱后,将洗脱液在95℃中温浴2min。在使用前冷却至室温。95℃温浴2min后也可以在洗脱液中加入10 mM NaCl以促进复性。

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