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- 技术资料
- 英文名:
UE PCR清洁试剂盒
- CAS号:
UE-PCR-50
- 供应商:
UE PCR清洁试剂盒
- 规格:
250T
产品概述:
储存条件
Buffer PCR-A:DNA结合溶液。室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate:去盐液。使用前,按试剂瓶上的指定体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%无水乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent: 洗脱液,室温密闭贮存。
流程图
常见问题解答:
◆得率低或者得不到DNA
·Buffer W2中没有加入乙醇
Buffer W2在使用之前必需加入100%或者95%的乙醇。
·不合适的洗脱液
DNA只能在低盐和pH7.0的条件下有效的洗脱。应使用试剂盒提供的洗脱液或者用水(pH7.0)洗脱。在65℃下预热洗脱液可以提高洗脱效率。
·洗脱液体积不够或者没有浸润膜
洗脱液应加在制备膜的中央以确保其均匀的浸润整个膜。
·采用不合适的负压装置
确保负压保持在 -25至-30英尺汞柱。
◆DNA不能很好地用于下游实验
·洗脱时盐浓度过高
确保在洗脱之前盐分都被洗涤去除。正确使用Buffer W1,避免在管体上残留。
·样品上样电泳时样品跑出胶孔
洗脱液中残留有乙醇(样品会飘在琼脂糖凝胶孔中)
仔细的操作说明书中的所有步骤以去除残留的乙醇。
·洗脱液中含有引物二聚体
引物二聚体会影响后续的反应,如测序。任何大于40bp的引物二聚体都将不会被完全去除。结合完后,用750ul盐酸胍(35g盐酸胍溶于100ml去离子水)洗涤UE PCR清洁制备管或者制备板,然后再接着进行说明书中所述的洗涤洗脱步骤。
·洗脱液中含有变性的单链DNA,这在凝胶电泳中可见一条又小又淡又糊的条带
洗脱后,将洗脱液在95℃中温浴2min。在使用前冷却至室温。95℃温浴2min后也可以在洗脱液中加入10 mM NaCl以促进复性。
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