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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 库存:
42
- 生长状态:
悬浮生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
详见说明书
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 英文名:
小鼠杂交瘤细胞株;1C7
- 规格:
株
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
以下是小鼠杂交瘤细胞株;1C7品牌详细说明:
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株;1C7品牌
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
小鼠杂交瘤细胞株;1C7品牌培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
小鼠杂交瘤细胞株;1C7品牌冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
FGF19 成纤维细胞生长因子19抗体 0.2ml
Ankyrin erythroid 红细胞蛋白Ank1抗体 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG 兔抗狗IgG 1mg
Salusin alpha 心血管调节肽Salusin-α抗体 0.2ml
C1orf187 1号染色体开放阅读框187抗体 0.2ml
KLH 血蓝蛋白抗体 0.2ml
MASP2 甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶2抗体 0.1ml
BFAR/RNF47 环指蛋白47抗体 0.2ml
γ-taxilin/LSR5 脂多糖相关反应蛋白5抗体 0.2ml
Goat Anti-Bovine IgG/Gold 胶体金标记的羊抗牛IgG 0.5ml
Phospho-Bad(Ser118) 磷酸化相关死亡促进因子抗体 0.1ml
小鼠杂交瘤细胞株;1C7品牌Tricosanoyl Ethanolamide (10 mg)N-(2-hydroxyethyl)-tricosanamide; Tricosanoyl Ethanolamide
6,7-Dimethyltetrahydropterin (hydrochloride) (10 mg)2-amino-5,6,7,8-tetrahydro-cis-6,7-dimethyl-4(1H)-pteridinone, hydrochloride; 6,7-Dimethyltetrahydropterin (hydrochloride)
6β-Prostaglandin I1 (50 mg)6S,9。alpha。-epoxy-11。alpha。,15S-dihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 5,6β-dihydro PGI2|6β-PGI1; 6β-Prostaglandin I1
17-trans Prostaglandin F3α (50 ug)9α,11α,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E,17E-trien-1-oic acid; 17-trans PGF3α; 17-trans Prostaglandin F3α
15(R)-Prostaglandin F2α (10 mg)9。alpha。,11。alpha。,15R-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15-epi PGF2α; 15(R)-Prostaglandin F2α
8-iso Prostaglandin A2 (50 mg)8-epi PGA2, 8-iso Prostaglandin A2, 9-oxo-15S-hydroxy-(8.beta.)-prosta-5Z,1,13E-trien-1-oic acid
trans-Urocanic Acid (1 g)3-(1H-imidazol-5-yl)-2E-propenoic acid
Juglone (500 mg)5-Hydroxy-1,4-naphthoquinone|NSC 153189|NSC 34266|NSC 622948; 5-hydroxy-1,4-naphthalenedione
Δ8-THC-d9 (1 mg)Δ8-Tetrahydrocannabinol-d9; 6aR,7,10,10aR-tetrahydro-6,6,9-trimethyl-3-pentyl-6H-dibenzo[b,d]pyran-1-ol-d9
FeTMPyP (100 mg)Fe(III)tetrakis (1-methyl-4-pyridyl) porphyrin pentachlorideporphyrin pentachloride; FeTMPyP
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文献和实验由于过度生长而死亡。因此制备鼠杂交瘤工作繁重且无法标准化及大规模生产。 在上世纪八十年代,制备一株鼠单抗并鉴定就可以成为一个博士论文的内容。1998 年,我们团队用新开发的兔杂交瘤融合细胞株在转基因小鼠上开展乳腺癌靶标研究,制备了上百个兔杂交瘤融合细胞的培养板。由于培养箱拥挤,一名实验员将其中的二十板杂交瘤细胞放在了其他实验室的培养箱,直到 6 周后(兔杂交瘤筛选应在 3~4 周),我在统计分析实验结果时才发现少了这二十板杂交瘤。按常理,这个时候这些杂交瘤细胞肯定全死了!但当实验员准备扔掉这二十板细胞
在液氮中保存的细胞株及体外传代培养的细胞株,都需要定期检查染色体数和抗体产生能力,因有些杂交瘤细胞会逐渐丢失染色体,使产生抗体的能力丧失或减弱。此时需及时进行克隆化,保留稳定分泌抗体的细胞株。 一、杂交瘤细胞染色体检查 材料和试剂 1. 秋水仙素。 2. 甲醇,冰醋酸。 3. Giemsa染液,玻片。 操作步骤 1. 取传代培养24h的细胞,加0.1ml秋水仙素,放37℃水浴4h。 2. 收集细胞2000r/min×10min离心弃上清,沉淀
培养无污染 (三)阳性克隆筛选 筛选方法以灵敏度高、特异性好、简便快捷为标准选择,还要考虑到抗原的具体性质。 (四)杂交瘤的克隆化 (五)杂交瘤细胞的冻存和复苏 (六)单克隆抗体的大量生产 · 体外培养法收获细胞上清 · 小鼠体内接种杂交瘤细胞收获腹水 三、单克隆抗体的鉴定 · 杂交瘤细胞核型分析 · 分泌抗体稳定性 · 单抗特异性鉴定 · 单抗Ig亚类的鉴定 · 识别
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